基于网络药理学与细胞实验的山柰酚抗结直肠癌作用机制研究

摘要

背景与目的：结直肠癌（CRC）发病率持续上升，晚期患者疗效有限，迫切需要开发新的抗肿瘤药物。山柰酚是一种天然黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎及抗癌活性。本研究结合网络药理学与实验验证，系统探讨山柰酚抗CRC的关键靶点及潜在机制。方法：通过SwissTargetPrediction、 SEA、 PharmMapper、 TargetNet等数据库筛选山柰酚潜在靶点，从GeneCards、OMIM、CTD、DrugBank数据库获取CRC相关靶点，取交集构建“化合物-靶点-疾病”网络。利用STRING数据库和Cytoscape软件分析蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）并筛选核心靶点，进一步进行GO与KEGG富集分析。采用人CRC HCT-116细胞进行CCK-8、克隆形成、划痕、Transwell实验及Western blot检测，验证山柰酚对细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡相关蛋白表达的影响。结果：共筛得山柰酚作用靶点492个、CRC相关靶点5 078个，交集269个。PPI分析鉴定出Akt1、HSP90AA1、ESR1、SRC、CASP3、NFKB1等53个核心靶点。GO分析提示这些靶点主要参与细胞应激反应、凋亡与氧化应激调控；KEGG分析显示主要涉及化学致癌-受体活化、催乳素、雌激素及PI3K/Akt信号通路。细胞实验证实山柰酚能明显抑制HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移与侵袭能力（均P<0.05），呈浓度依赖关系，并下调Bcl-2和cyclin D1、上调Bax的表达（均P<0.05）。结论：山柰酚可通过多靶点、多通路协同作用抑制CRC细胞的增殖、迁移与侵袭，并诱导凋亡，其机制可能与调控PI3K/Akt及雌激素信号通路等密切相关。本研究为山柰酚作为CRC潜在治疗药物提供了理论依据与实验支持。

关键词

结直肠肿瘤 / 山柰酚类 / 网络药理学 / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 肿瘤浸润