miR-186-5p靶向MTDH抑制HER2阳性乳腺癌移植瘤生长的实验研究

摘要

背景与目的：人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌侵袭性强、预后较差，微小RNA(miRNA)在其发生发展中发挥重要调控作用。miR-186-5p作为新近报道的肿瘤相关miRNA，其在HER2阳性乳腺癌中的作用机制尚未明确。本研究旨在探讨miR-186-5p对异黏蛋白（MTDH）的靶向调控关系及其对HER2阳性乳腺癌移植瘤生长的影响。方法：采用TargetScan预测miR-186-5p与MTDH的靶向结合位点，并通过双荧光素酶报告实验验证。构建miR-186-5p过表达、MTDH过表达及联合转染的BT-474细胞系，检测各组miR-186-5p与MTDH的m RNA和蛋白表达。将转染后的细胞接种于裸鼠皮下建立HER2阳性乳腺癌移植瘤模型，动态观察肿瘤生长情况，并于第28天测定肿瘤体积与质量，同时检测移植瘤组织中miR-186-5p和MTDH的表达水平。结果：双荧光素酶报告实验表明，miR-186-5p可直接靶向结合MTDH mRNA的3'-UTR。与阴性对照组比较，miR-186-5p过表达可明显下调MTDH mRNA及蛋白表达，而MTDH过表达可上调其表达，并可部分逆转miR-186-5p对MTDH的抑制作用（均P<0.05）。体内实验结果显示，miR-186-5p过表达组移植瘤的生长速度、肿瘤体积及质量均明显低于阴性对照组，MTDH过表达组则明显升高（均P<0.05），而miR-186-5p与MTDH联合转染组与阴性对照组差异无统计学意义（均P>0.05）。体内实验进一步证实，在移植瘤组织中，miR-186-5p过表达组miR-186-5p水平明显升高，MTDH的m RNA及蛋白表达明显下调；MTDH过表达组MTDH表达显著升高；联合转染组MTDH表达与阴性对照组差异无统计学意义（均P>0.05）。免疫组化结果与分子检测结果一致。结论：miR-186-5p可通过靶向抑制MTDH的表达，显著抑制HER2阳性乳腺癌小鼠移植瘤的生长，二者可能构成HER2阳性乳腺癌的重要调控通路，为其分子靶向治疗提供了新的实验依据。

关键词

乳腺肿瘤 / 微RNAs / 异黏蛋白 / 肿瘤移植 / 小鼠