GABRD促进肝细胞癌恶性进展及美金刚靶向干预作用研究

摘要

背景与目的:γ-氨基丁酸A型受体δ亚基(GABRD)在多种恶性肿瘤中异常表达并参与肿瘤进展,但其在肝细胞癌(HCC)中的生物学作用及药物干预价值尚不明确。本研究旨在探讨GABRD在HCC中的表达特征、促癌作用及其潜在分子机制,并筛选针对GABRD的候选药物。方法:基于HCCDB和TCGA数据库分析GABRD表达及预后价值,并结合临床组织样本进行验证。采用CRISPR/Cas9敲除和慢病毒过表达技术构建GABRD功能获得与缺失模型,通过CCK-8、EdU、克隆形成、划痕愈合及Transwell实验评价其对HCC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;利用皮下移植瘤、自发性肝癌及肺转移模型验证其体内作用。通过RNA测序结合GO、KEGG及GSEA分析探索其潜在机制。进一步采用结构基础虚拟筛选、分子对接及分子动力学模拟筛选靶向GABRD的小分子药物,并通过体内外实验验证其抗肿瘤作用。结果:GABRD在HCC组织及细胞中显著高表达,其高表达与患者总体生存期、疾病特异性生存期及无进展生存期缩短密切相关。敲除GABRD显著抑制HCC细胞增殖、迁移及侵袭能力,而过表达GABRD则产生相反效应。动物实验显示,GABRD缺失可明显抑制肿瘤生长和肺转移。转录组分析提示,GABRD可能通过调控细胞因子-细胞因子受体相互作用、JAK-STAT及上皮-间充质转化相关通路促进HCC进展。基于结构的虚拟筛选发现,美金刚与GABRD具有较高结合亲和力,并可下调GABRD表达水平。体内外实验进一步证实,美金刚能够显著逆转GABRD介导的促增殖、促侵袭及促转移作用。结论:GABRD在HCC中高表达并促进肿瘤恶性进展,是潜在的不良预后标志物和治疗靶点。美金刚可通过靶向GABRD抑制HCC生长与转移,为HCC的靶向治疗及老药新用提供新的实验依据。

关键词

癌,肝细胞 / 受体,GABA-A / 美金刚

基金资助

国家自然科学基金资助项目(82300727); 重庆市卫生健康委医学青年拔尖人才基金资助项目(YXQN2025008); 重庆市自然科学基金资助项目(CSTB2025NSCQ-GPX0061); 陆军军医大学科技创新能力提升专项基金资助项目(2022XQN30)