枸杞糖肽对角膜碱烧伤小鼠角膜炎症反应及愈合的作用及其机制研究

摘要

目的 探讨枸杞糖肽（LbGp）在角膜碱烧伤损伤愈合中的作用及其机制。方法 根据治疗方式不同将45只健康、SPF级、6～8周、雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组（N组）、损伤对照组（PBS组）、LbGp治疗组（LbGp组），每组15只。PBS组和LbGp组小鼠右眼复制碱烧伤模型，采用点眼联合结膜下注射的方式分别给予PBS溶液或LbGp溶液（10 mg/mL）治疗。治疗后第3天采用裂隙灯显微镜及HE染色观察各组小鼠角膜上皮修复情况和角膜组织结构；实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting及免疫组织化学染色技术检测各组小鼠角膜组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、髓过氧化物酶（MPO）的表达及核转录因子κB(NF-κB)的磷酸化水平。治疗后的第14天采用裂隙灯显微镜对角膜混浊程度进行评分，HE染色观察角膜组织结构。结果 治疗后第3天LbGp组小鼠角膜上皮愈合速度快于PBS组（P <0.05）。N组、PBS组及LbGp组的NF-κB-p65、NLRP3、IL-1β及IL-6基因和蛋白相对表达量比较，差异均有统计学意义（P <0.05）,PBS组均高于N组（P <0.05）,LbGp组均低于PBS组（P <0.05）。LbGp组角膜基质中MPO染色阳性的中性粒细胞的浸润较PBS组减轻。治疗后第14天LbGp组小鼠角膜混浊评分低于PBS组（P <0.05）。结论 LbGp治疗可以抑制小鼠角膜碱烧伤后NF-κB的激活及NLRP3、IL-1β的表达，从而减轻过度的炎症反应，促进小鼠角膜上皮再生及角膜结构恢复，有助于恢复角膜的透明性和完整性。

关键词

角膜 / 碱烧伤 / 炎症反应 / 枸杞糖肽 / 核转录因子κB / NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 / 白细胞介素-1β