LncRNA FEZF1-AS1调控特发性肺间质纤维化的机制研究

摘要

目的 探讨FEZ家族锌指1-反义RNA 1（LncRNA FEZF1-AS1）对肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮-间充质相互作用（EMT）的影响及其作用机制。方法 将转化生长因子-β₁（TGF-β₁）作用于A549细胞，诱导肺间质纤维化细胞模型，将其分为空白对照组（A549细胞组）和模型组。Western blotting检测细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）表达，观察模型复制是否成功；实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达。根据实验目的和转染质粒不同，将A549细胞分为空白对照组（Blank组）、TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组、TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1组。CCK-8法检测细胞增殖能力；细胞划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell检测细胞侵袭能力。Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达；qRT-PCR检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达。结果 模型组E-cadherin蛋白相对表达量较空白对照组降低（P <0.05）,N-cadherin及Vimentin蛋白相对表达量较空白对照组升高（P <0.05）；模型组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量较空白对照组升高（P <0.05）,miR-200c-3p基因相对表达量较空白对照组降低（P <0.05）。与Blank组比较，TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组细胞增殖、迁移、侵袭能力升高（P <0.05）；与TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较，TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低（P<0.05）。与TGF-β₁+SiLncRNAFEZF1-AS1NC组比较，TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量及N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量降低（P <0.05）,E-cadherin蛋白相对表达量升高（P <0.05）；与TGF-β₁+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较，TGF-β₁+SiLncRNAFEZF1-AS1组和Blank组miR-200c-3p基因相对表达量升高（P<0.05）。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭及EMT过程。

关键词

特发性肺间质纤维化 / LncRNA FEZF1-AS1 / miR-200c-3p / 上皮-间充质相互作用

基金资助

国家自然科学基金（No:82205079）; 山东省中医药科技面上项目（No:M-2023030）