益气活血化浊解毒方调控KAT3B/STING轴介导的小胶质细胞极化对缺血性脑卒中大鼠神经功能的影响

摘要

目的 探讨益气活血化浊解毒方调控KAT3B/STING轴介导的小胶质细胞极化对缺血性脑卒中大鼠神经功能的影响。方法 复制缺血性脑卒中大鼠模型。将复制成功的60只大鼠分为缺血性脑卒中组、益气活血化浊解毒方低剂量组（低剂量组）、益气活血化浊解毒方高剂量组（高剂量组）、益气活血化浊解毒方高剂量+2,5-己酮可可碱（DMXAA）组（高剂量+DMXAA组），每组15只。另取15只正常大鼠为Sham组。低剂量组大鼠灌胃0.2 mL 27.5 g/mL的益气活血化浊解毒方药液，高剂量组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液，高剂量+DMXAA组大鼠灌胃0.2 mL 55.0 g/mL的益气活血化浊解毒方药液和25 mg/kg的DMXAA,Sham组和缺血性脑卒中组给予等体积生理盐水代替药物；除高剂量+DMXAA组外，其余组大鼠再给予等体积二甲基亚砜溶液灌胃，1 d/次，连续4周。Zea-Longa评分和网屏试验评分评估大鼠神经功能和神经行为学；检测大鼠脑组织含水量；TTC染色法检测大鼠脑梗死面积；酶联免疫吸附试验检测大鼠血清LDH和NGF水平和缺血侧皮层组织TNF-α、IL-6、IL-10水平；HE染色观察大鼠缺血侧皮层组织病理变化；Western blotting检测大鼠缺血侧皮层组织iNOS、Iba1、CD68、CD40、CD206、Arg-1、Cleaved caspase-3、KAT3B、STING蛋白表达。结果 缺血性脑卒中组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于Sham组（P <0.05），低剂量组和高剂量组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均低于缺血性脑卒中组（P <0.05），高剂量+DMXAA组大鼠Zea-Longa评分和网屏试验评分、脑组织含水量、脑梗死面积百分比均高于高剂量组（P <0.05）。缺血性脑卒中组大鼠NGF和IL-10水平低于Sham组，LDH、TNF-α和IL-6水平高于Sham组（P <0.05）；低剂量组和高剂量组大鼠NGF和IL-10水平高于缺血性脑卒中组，LDH、TNF-α和IL-6水平低于缺血性脑卒中组（P <0.05）；高剂量+DMXAA组大鼠NGF和IL-10水平低于高剂量组，LDH、TNF-α和IL-6高于高剂量组（P <0.05）。与缺血性脑卒中组比较，低剂量组和高剂量组缺血侧皮层神经元形态有明显改善。缺血性脑卒中组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比Sham组高，CD206和Arg-1蛋白相对表达量比Sham组低（P <0.05）；低剂量组和高剂量组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组低，CD206和Arg-1蛋白相对表达量比缺血性脑卒中组高（P <0.05）；高剂量+DMXAA组大鼠缺血侧皮层组织中iNOS、Iba1、CD68和CD40蛋白相对表达量比高剂量组高，CD206和Arg-1蛋白相对表达量比高剂量组低（P <0.05）。结论 益气活血化浊解毒方可调节缺血性脑卒中大鼠小胶质细胞极化，减轻神经炎症和神经损伤，改善神经功能，可能与抑制KAT3B/STING轴有关。

关键词

缺血性脑卒中 / 益气活血化浊解毒方 / KAT3B/STING轴 / 小胶质细胞极化 / 神经功能

基金资助

河北省中医药管理局2021年度中医药类科研指令性计划课题（No:2021069）