葫芦茶苷调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制肝星状细胞活化的作用机制

摘要

目的 探讨葫芦茶苷调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制肝星状细胞（HSCs）活化的作用机制。方法 制备人HSCs的体外细胞（LX-2细胞）模型，采用CCK-8法检测葫芦茶苷对LX-2增殖的影响。将对数生长期的LX-2细胞随机分成5组：空白组、TGF-β₁活化组、TGF-β₁+葫芦茶苷低剂量组、TGF-β₁+葫芦茶苷中剂量组、TGF-β₁+葫芦茶苷高剂量组，除空白组外，其余各组分别加入含终浓度为5μg/L的TGF-β₁的培养液，使其增殖活化24 h，再对葫芦茶苷低、中、高剂量组加入终浓度分别为20、40和80μg/mL的葫芦茶苷进行干预。CCK-8法检测葫芦茶苷对LX-2细胞增殖的影响。酶联免疫吸附试验检测细胞上清液白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）、白细胞介素-6（IL-6）、干扰素α（INF-α）表达水平。实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting实验检测细胞中NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白相对表达量。结果 葫芦茶苷能显著抑制LX-2细胞的增殖。与空白组比较，TGF-β₁活化组细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6、INF-α表达水平，以及细胞NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白相对表达量明显上升（P<0.05）。葫芦茶苷干预后，与TGF-β₁活化组比较，葫芦茶苷不同剂量组降低细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6、INF-α表达水平，下调细胞NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白表达（P<0.05）。结论 葫芦茶苷能显著抑制HSCs增殖活化，其机制可能与调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路有关。

关键词

肝纤维化 / 葫芦茶苷 / 肝星状细胞 / NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路

基金资助

广西自然科学基金（No:2023GXNSFAA026199）; 广西中医药管理局科研课题（No:GXZYA20220180,GXZYZ20210209）; 广西中医药大学校级科研项目（No:2021MS015）