基于非靶向代谢组学及实验验证探讨蒙药额力根汤治疗肝纤维化的作用机制

摘要

目的 采用非靶向代谢组学及实验验证探讨蒙药额力根汤（ET）治疗肝纤维化的作用机制。方法 将50只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、ET低剂量组（90 mg/100 g）、ET中剂量组（180 mg/100 g）、ET高剂量组（450 mg/100 g）。采用腹腔注射四氯化碳CCl₄复制肝纤维化大鼠模型，并在此基础上采用ET干预，干预21 d后取肝脏组织进行非靶向代谢组学分析。采用苏木精-伊红染色和Masson染色检测肝脏病理变化。酶联免疫吸附试验检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及肝脏羟脯氨酸（Hyp）的水平。实时荧光定量聚合酶链反应检测肝脏组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和胶原蛋白Ⅰ（CollagenⅠ）的基因相对表达量；Western blotting检测肝脏组织α-SMA、CollagenⅠ的蛋白相对表达量，以及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）信号通路与转化生长因子-β（TGF-β）信号通路的蛋白相对表达量。结果 模型组共筛选出83种差异代谢物（P<0.05）。与对照组比较，模型组大鼠肝脏间质结构有纤维化损伤；模型组血清ALT、AST及Hyp水平，肝脏组织CollagenⅠ、α-SMA水平，肝脏组织pSmad2和p-Smad3表达均升高（P<0.05），肝脏组织PPARγ水平降低（P<0.05）。ET给药组筛选出34个明显回调肝纤维化发病相关的差异代谢物（P<0.05）。与模型组比较，ET给药组大鼠肝脏纤维化损伤减轻；血清ALT、AST及Hyp水平，肝脏组织CollagenⅠ、α-SMA水平，肝脏组织p-Smad2和p-Smad3表达均降低（P<0.05）；肝脏组织PPARγ水平上升（P<0.05）。结论 ET可以调节肝纤维化状态下PPAR信号通路与TGF-β信号通路，缓解CCl₄导致的大鼠肝纤维化。

关键词

肝纤维化 / 额力根汤 / 非靶代谢组学 / 实验验证 / 大鼠

基金资助

国家自然科学基金（No:8216140372,82160703）; 内蒙古自治区自然科学基金（No:2023ZD15）; 内蒙古自治区高等学校青年科技英才支持项目（No:NJYT23114）; 中央引导地方科技发展专项资金（No:ZY20200071）; 内蒙古卫生局卫生科技计划（No:202202158）; 内蒙古医科大学重点项目（No:YKD2022ZD013）; 内蒙古自治区蒙医药标准化项目（2023-[MB020]）