PRP-Exos通过TLR4/NF-κB通路对神经病理性疼痛的作用及其机制研究

摘要

目的 探讨富血小板血浆来源外泌体（PRP-Exos）通过TLR4/NF-κB信号通路对坐骨神经损伤（SNI）大鼠神经病理性疼痛的作用及其分子机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和PRPExos组，每组10只。模型组和PRP-Exos组采用SNI法复制神经病理性疼痛模型。PRP-Exos组模型复制后第7天起鞘内注射200 mg/L PRP-Exos(0.5 mL/次，隔日1次，共10次)，模型组注射等体积生理盐水。检测干预前后大鼠机械痛阈值（MWT）、热痛阈值（TWL）及坐骨神经运动神经传导速度（MNCV）；干预结束后，坐骨神经甲苯胺蓝染色观察病理形态，透射电镜观察并测量有髓神经纤维的轴突直径和髓鞘厚度，酶联免疫吸附试验测定脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平，Western blotting检测脊髓Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、p65蛋白表达。结果 空白组、模型组和PRP-Exos组术前、模型复制后第6天、给药10次时MWT、TWL、MNCV水平比较，结果：(1)不同时间点MWT和TWL水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。(2)3组MWT、TWL、MNCV水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；与空白组相比，模型组和PRP-Exos组模型复制后第6天、给药10次时MWT、TWL、MNCV水平均降低；与模型组相比，PRPExos组给药10次时MWT、TWL、MNCV水平均升高。(3)3组MWT、TWL、MNCV水平变化趋势比较，差异有统计学意义（P<0.05）。与空白组相比，模型组和PRP-Exos组轴突直径和髓鞘厚度均减小（P<0.05）；与模型组相比，PRP-Exos组轴突直径和髓鞘厚度均增大（P<0.05）。与空白组相比，模型组和PRP-Exos组TNF-α、IL-6水平和TLR4、NF-κB p65蛋白相对表达量均升高（P<0.05）；与模型组相比，PRP-Exos组TNF-α、IL-6水平和TLR4、NF-κB p65蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。结论 PRP-Exos可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路，减少脊髓炎症因子释放，改善SNI大鼠神经病理形态，从而缓解神经病理性疼痛。

关键词

神经病理性疼痛 / 坐骨神经分支选择性损伤 / 富血小板血浆外泌体 / 鞘内注射 / TLR4/NF-κB信号通路