氧化三甲胺对血管内皮细胞线粒体功能的作用研究

摘要

目的 探讨氧化三甲胺（TMAO）对血管内皮细胞线粒体功能的影响。方法 使用不同浓度的TMAO(50、100和150 mmol/L)刺激人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC） 24 h，或使用100 mmol/L浓度的TMAO干预HUVEC不同的时间（12、24和36 h）。利用CCK-8法检测HUVEC的细胞活力；采用Annexin VFITC/PI双染法检测细胞凋亡水平；使用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液内皮素-1(ET-1)、白细胞介素-18(IL-18)、IL-1β、IL-6和IL-10水平；采用罗丹明-123探针检测线粒体膜电位（MMP）；采用MitoSOX Red探针检测线粒体活性氧（mtROS）；使用Calcein AM染色检测线粒体通透性转换孔（MPTP）的开放程度。结果 TMAO浓度自50 mmol/L开始，细胞活力开始降低，且呈剂量依赖性变化（P<0.05）。TMAO干预12 h后，细胞活力显著降低，且呈时间依赖性变化（P<0.05）。不同浓度TMAO组细胞凋亡率均高于对照组（P<0.05）。对照组ET-1水平低于不同浓度TMAO组（P<0.05）。对照组IL-18、IL-1β、IL-6水平均低于不同浓度TMAO组（P<0.05）,IL-10水平高于不同浓度TMAO组（P<0.05）。不同浓度TMAO组罗丹明-123相对表达量均低于对照组（P<0.05）。TMAO处理24、36 h组罗丹明-123相对表达量均低于对照组（P<0.05）。100、150 mmol/L TMAO组MitoSOX相对表达量均高于对照组（P<0.05）。不同干预时间TMAO组MitoSOX相对表达量均高于对照组（P<0.05）。不同浓度TMAO组Calcein AM相对表达量均低于对照组（P<0.05）。不同干预时间TMAO组Calcein AM相对表达量均低于对照组（P<0.05）。结论 TMAO可诱导内皮细胞线粒体功能障碍。

关键词

动脉粥样硬化 / 氧化三甲胺 / 内皮细胞 / 线粒体功能障碍