自噬对小鼠围着床期子宫内膜容受性的影响

摘要

目的 探究自噬对小鼠围着床期子宫内膜容受性的影响。方法 将36只ICR妊娠雌鼠随机分为空白组与自噬抑制剂组，每组18只。自噬抑制剂组自妊娠第1天（PD1）起，每日腹腔注射自噬抑制剂3-MA直至处死，空白组每日腹腔注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照，各组分别于PD4、PD5、PD6以颈椎脱臼法处死6只小鼠。观察各组小鼠子宫形态，计数胚胎着床位点数，分别采用实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting检测子宫内膜组织中自噬相关因子Beclin-1、微管相关蛋白轻链3-Ⅰ（LC3-Ⅰ）、LC3-Ⅱ及子宫内膜容受性相关标志物雌激素受体α(ERα)、孕激素受体（PR）、同源框基因A10(HOXA10)mRNA与蛋白表达量，采用扫描电镜观察各组小鼠子宫内膜胞饮突形态，采用透射电镜观察子宫内膜细胞自噬体结构。结果 空白组PD4子宫无明显串珠状改变，PD5、PD6着床部位宫体膨大，形成串珠状，均匀分布，色泽红润；自噬抑制剂组PD4子宫色淡白、较细，无明显串珠状改变；PD5、PD6胚胎着床部位宫体轻度膨大，着床数目较少，分布不均匀，色淡红。自噬抑制剂组PD5、PD6胚胎着床位点数较空白组减少（P<0.05）。与空白组PD4、PD5、PD6比较，自噬抑制剂组PD4、PD5、PD6 LC3-ⅡmRNA相对表达量均降低（P<0.05）。与空白组PD4、PD5、PD6比较，自噬抑制剂组LC3-Ⅱ蛋白相对表达量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低（P<0.05）,LC3-Ⅰ蛋白相对表达量升高（P<0.05）。与空白组PD4、PD5、PD6比较，自噬抑制剂组PR mRNA相对表达量降低（P<0.05）；与空白组PD4、PD5比较，自噬抑制剂组HOXA10 mRNA相对表达量降低（P<0.05）。与空白组PD4、PD5、PD6比较，自噬抑制剂组ERα蛋白相对表达量升高（P<0.05）；与空白组PD5、PD6比较，自噬抑制剂组PD5、PD6 PR、HOXA10蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。扫描电镜下，空白组PD4子宫内膜表面可见少量胞饮突，PD5、PD6胞饮突数目多，大小均一；自噬抑制剂组PD4子宫内膜表面胞饮突结构不明显且皱缩，PD5、PD6胞饮突数目少，大小不均。透射电镜下，空白组PD4子宫内膜细胞中自噬溶酶体数量较多，PD5、PD6数量减少；自噬抑制剂组PD4可见少量自噬溶酶体，PD5、PD6未见明显自噬溶酶体，较空白组明显减少。结论 自噬可能影响围着床期子宫内膜容受性的建立与调节，参与胚胎着床过程。

关键词

子宫内膜容受性 / 自噬 / 胚胎着床 / 小鼠