lncRNA LOC101928477在食管鳞状细胞癌中的作用研究

摘要

目的 探讨lncRNA LOC101928477对人食管鳞状细胞癌（ESCC）ECA109细胞增殖、迁移、凋亡及自噬的生物学作用，并探索其相关分子调控关联。方法 将ECA109细胞分为5组：A组（空白对照，仅培养ECA109细胞）、B组（空载病毒对照，ECA109+oe-NC）、C组（LOC101928477过表达，ECA109+oeLOC101928477）、D组（miR-139-5p抑制剂，ECA109+miR-139-5p抑制剂）、E组（联合干预，ECA109+miR-139-5p抑制剂+oe-LOC101928477）。CCK-8法检测细胞活性，流式细胞术分析细胞凋亡，划痕试验评估细胞迁移能力，实时荧光定量聚合酶链反应检测LOC101928477和miR-139-5p的mRNA表达，Western blotting检测自噬相关蛋白（Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62）的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 A组与B组ECA109细胞活力、细胞凋亡率、细胞迁移能力、LOC101928477 mRNA及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62蛋白表达，以及TNF-α、IL-6水平比较，差异均无统计学意义（P >0.05）；与B组相比，C组ECA109细胞活力、细胞迁移能力降低，细胞凋亡率升高，Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著上调，P62蛋白表达下调，TNF-α和IL-6水平升高（P<0.05）；与C组相比，D组上述LOC101928477诱导的表型效应及自噬激活均逆转（P<0.05）；与D组相比，E组细胞活力、细胞迁移能力进一步降低，凋亡率及自噬活性进一步升高，TNF-α和IL-6水平也进一步升高（P<0.05）。结论 lncRNA LOC101928477可激活ECA109细胞自噬，抑制ECA109的增殖与迁移，促进细胞凋亡，并上调炎症因子TNF-α和IL-6水平；其发挥上述抑癌作用的分子机制与调控miR-139-5p的表达相关，可为ESCC的靶向治疗提供新的理论依据。

关键词

食管鳞状细胞癌 / lncRNA LOC101928477 / microRNA-139-5p / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 细胞迁移 / 自噬