环状RNA hsa＿circ＿0006156在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及其对Raji细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的：研究hsa＿circ＿0006156对Raji细胞增殖、凋亡的影响及其在系统性红斑狼疮（SLE）发生、发展中的作用。方法：收集广西医科大学第一附属医院皮肤性病科2021年9月至2023年9月收治的55例SLE患者（SLE组），并以40例健康对照者作为对照组（HC组），分离出外周血单个核细胞（PBMC）及CD20+B淋巴细胞，使用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测hsa＿circ＿0006156表达水平；采用受试者工作特征曲线（ROC）分析hsa＿circ＿0006156的诊断效能。以Raji细胞为研究对象，使用慢病毒构建hsa＿circ＿0006156过表达模型，将细胞分为hsa＿circ＿0006156过表达组（OE组）、转染空病毒载体的阴性对照组（NC组）以及空白对照组（control组）。利用CCK8法检测0 h、6 h、12 h、18 h、24 h、30 h、36 h细胞450 nm吸光度，计算OE组和NC组增殖率。Western blotting实验检测各组Bcl-2、cleaved caspase-3凋亡蛋白表达水平。结果：与HC组比较，SLE组PBMC和CD20+B淋巴细胞中hsa＿circ＿0006156表达量均明显降低（P<0.001）。ROC曲线分析显示，hsa＿circ＿0006156区分SLE和HC的ROC曲线下面积（AUC）为0.787 3(95%CI:0.697 5～0.877;P<0.001)，敏感度为97.5%，特异度为50.9%，对SLE诊断Cut-off值为<0.652。hsa＿circ＿0006156表达量在无活动或轻度活动与中重度活动患者之间存在显著差异（P=0.0148）。CCK8实验结果显示，在36 h时，OE组Raji细胞增殖较NC组受到明显抑制（P<0.001）。Western blotting检测结果表明，与NC组和control组比较，OE组Bcl-2蛋白表达水平降低，而cleaved caspase-3蛋白表达水平升高（均P<0.05）。结论：hsa＿circ＿0006156对SLE具有一定的诊断效能。hsa＿circ＿0006156可能是通过调节B细胞的增殖、凋亡影响SLE的发生、发展。

关键词

系统性红斑狼疮 / 环状RNA / hsa＿circ＿0006156 / Raji细胞