木瓜粗多糖的免疫调节活性研究

摘要

目的:探讨木瓜粗多糖（CSP）的免疫调节活性及其作用机制。方法:以小鼠巨噬细胞RAW264.7作为体外模型，通过MTT法评估CSP对RAW264.7细胞的毒性影响。利用中性红法检测CSP对细胞吞噬功能的作用。采用Griess法和DCFH-DA荧光探针法分别测定不同浓度CSP处理下RAW264.7细胞释放的NO和ROS水平。通过ELISA法测定不同浓度CSP处理后细胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α的浓度。运用Western blot检测CSP对MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。同时，以斑马鱼为体内模型，评价CSP对NO和ROS释放的影响。结果:MTT法结果表明CSP处理未显著改变细胞存活率; 50μg·m L^-1和100μg·m L^-1浓度的CSP显著促进RAW264.7巨噬细胞的增殖（P<0.05），且细胞吞噬活性显著增强（P<0.01），此效应呈现剂量依赖性;当CSP浓度达到200μg·m L^-1时，观察到RAW264.7细胞的吞噬指数最大;不同浓度CSP处理后，与空白对照组相比，RAW264.7细胞释放的NO和ROS水平显著升高（P<0.01）; ELISA分析结果显示，CSP处理显著促进了巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6和IL-1β等细胞因子; Western blot分析结果表明，CSP处理有效激活了MAPK信号通路，在斑马鱼胚胎模型中，CSP处理同样显著提升了ROS和NO的生成。结论:木瓜粗多糖表现出显著的免疫调节活性。

关键词

木瓜 / 多糖 / 小鼠巨噬细胞 / 免疫调节活性