探讨活血养阴法调控Bcl-2/Bax通路改善精索静脉曲张大鼠生精功能的作用机制

摘要

目的 基于B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)通路探讨活血养阴法改善精索静脉曲张大鼠生精功能的作用机制。方法 选取8周龄SD雄性大鼠30只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、左卡尼汀组(1.0 g/kg)、活血养阴法低剂量组(5.2 g/kg)、活血养阴法中剂量组(10.4 g/kg)及活血养阴法高剂量组(20.8 g/kg),每组5只。除假手术组外，其余大鼠均通过经典的Turner法复制精索静脉曲张模型。术后4周，假手术组及模型组大鼠灌胃生理盐水，各给药组灌胃相应药物，每日1次，连续4周。灌胃结束后，使用计算机辅助精子分析仪检测精子质量，HE染色法观察睾丸组织病理学形态并通过Johnsen评分评价睾丸生精功能，TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况，实时荧光PCR法检测睾丸组织Bcl-2及Bax mRNA表达，免疫组织化学法检测细胞色素C蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠的精子总数、精子活动率及(a+b)级精子率均降低(P<0.05);睾丸组织中生精小管排列紊乱，有明显空泡样改变，Johnsen评分下降(P<0.05);睾丸组织细胞凋亡率增加(P<0.05);睾丸组织Bax mRNA表达上升(P<0.05);细胞色素C蛋白阳性表达增加(P<0.05)。与模型组比较，活血养阴法中剂量组大鼠的精子总数，低、中剂量组精子活动率，以及低剂量组(a+b)级精子率均上升(P<0.05);大鼠睾丸病理学结构有不同程度的改善，活血养阴法中剂量组Johnsen评分增加(P<0.05);左卡尼汀组与活血养阴法各剂量组睾丸细胞凋亡率均下降(P<0.05);活血养阴法低、高剂量组Bcl-2 mRNA表达上升(P<0.05),左卡尼汀组与活血养阴法中剂量组Bax mRNA表达下降(P<0.05);活血养阴法中剂量组细胞色素C蛋白阳性表达下降(P<0.05)。结论 活血养阴法可提高精索静脉曲张大鼠的精子质量，修复损伤的睾丸组织结构，改善生精功能，其作用机制可能与激活Bcl-2/Bax凋亡通路、抑制细胞凋亡有关。

关键词

活血养阴法 / 精索静脉曲张 / 生精功能 / 细胞凋亡 / B淋巴细胞瘤-2/B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白通路 / 大鼠

基金资助

广东省中医药局中医药科研项目面上项目(No.202205111913416600); 珠海市科技局项目(No.2220004000307,No.2320004000300)