黄芩苷调控炎性因子治疗肠道急性移植物抗宿主病的研究

摘要

目的 探讨黄芩苷干预肠道急性移植物抗宿主病（acute graft versus host disease, aGVHD）的作用机制。方法 分离采集健康志愿者和肠道aGVHD患者的外周血单个核细胞，富集分析其测序得到的差异mRNA,取差异mRNA与黄芩苷作用靶点的交集并进行分析。制备SPF级BALB/c H-2 d雄性小鼠的单核细胞悬液（1×10～7骨髓细胞+1×10～7脾细胞）,将其通过尾静脉输入4 h内照射了⁶⁰Co-X射线的SPF级CB6F1雌性小鼠，造模后小鼠随意分为模型组、黄芩苷组。另取6只CB6F1雌性小鼠作为正常组。造模后黄芩苷组给予30 mg/（kg·d）黄芩苷灌胃，模型组与正常组予等容量的生理盐水灌胃，连续14 d,每日观察小鼠生存状况。干预结束，检测小鼠血清细胞因子，进行小鼠肠道aGVHD相对评分、小肠黏膜病理炎症评分，小肠组织免疫组化、免疫荧光检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）表达。结果 筛选到健康志愿者与肠道aGVHD患者差异mRNA共2 131个，KEGG分析发现集中在肿瘤坏死因子等通路上。分析差异基因与黄芩苷作用靶点交集，发现TNF-α、IL-2是黄芩苷治疗肠道aGVHD的核心靶点。小鼠aGVHD模型研究发现，经过黄芩苷治疗后，与模型组比较，黄芩苷组aGVHD相对评分、小肠黏膜病理炎症相对评分降低，血清TNF-α、IL-2下降，小肠免疫组化及免疫荧光检测的TNF-α、IL-2表达均降低，均P<0.05。结论 黄芩苷能够抑制血清和小肠黏膜TNF-α、IL-2的水平和浸润，降低移植后肠道aGVHD的发病率。

关键词

黄芩苷 / 急性移植物抗宿主病 / 肿瘤坏死因子-α / 白细胞介素-2 / 肠黏膜 / 网络药理学 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金面上项目(No.81774080); 泰山学者青年专家人才项目(No.tsqn201812145)