加味四君子汤通过影响5-羟色胺及其受体对斑马鱼肠道出血模型的止血效应及其机制探讨

摘要

目的 探讨加味四君子汤(党参、茯苓、白术、炙甘草、黄芪、阿胶、茜草)通过影响5-羟色胺(5-HT)及其受体(5-HT2aR、5-HT2bR)对斑马鱼肠道出血模型的止血作用及其机制。方法 以受精后4 d的斑马鱼为研究对象，6μmol/L辛伐他汀诱导24 h建立肠道出血模型。将斑马鱼利用随机数字表法分为正常组，模型组，加味四君子汤低、中、高质量浓度组(55.6、167、500 mg/L),造模后，给予相应质量浓度加味四君子汤，24 h后收样。观察血小板计数(PLT)及出血情况，比色法检测5-HT含量及Caspase 3/7活性，实时PCR法检测5-HT2aR、5-HT2bR、5-HT转运蛋白(SERT)基因表达，蛋白质印迹法检测蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调解蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达。结果 模型组肠道出血发生率为70.0%,加味四君子汤低、中、高质量浓度组出血发生率为36.7%、40.0%、80.0%,肠道止血作用分别为54%、52%、7%。与模型组比较，加味四君子汤低、中质量浓度组PLT减少；各质量浓度组5-HT含量升高、5-HT2aR及5-HT2bR基因表达上调，低、中质量浓度组SERT基因表达上调；中、高质量浓度组Caspase 3/7活性降低；低、中质量浓度组p-AKT、p-ERK蛋白表达上调(均P<0.05)。结论 加味四君子汤可减少斑马鱼肠道出血模型的出血发生率及出血程度，其机制可能是通过5-HT及其受体激活AKT和ERK信号通路实现的。

关键词

免疫性血小板减少症 / 加味四君子汤 / 5-羟色胺 / 5-羟色胺受体 / 蛋白激酶B / 细胞外调解蛋白激酶 / 斑马鱼

基金资助

国家自然科学基金项目(No.81803904); 浙江省自然科学基金项目(No.LQ23H270001); 浙江省中医药管理局项目(No.2024ZL407)