电针对腰竖脊肌损伤模型大鼠穴区外泌体释放及肌肉再生修复的影响

摘要

目的 探讨电针对竖脊肌损伤模型大鼠穴区外泌体释放及肌肉再生修复的影响。方法 采用随机数字表法，将40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组、模型组、电针组、电针+外泌体抑制剂组，每组10只。模型组、电针组、电针+外泌体抑制剂组采用0.5%布比卡因肌肉注射制备竖脊肌损伤模型大鼠。造模24 h后，电针组和电针+外泌体抑制剂组大鼠分别予以电针双侧“委中”“肾俞”治疗，波形选择疏密波，频率2/10 Hz,电流强度1 mA,每日1次，每次20 min,连续干预7 d。电针+外泌体抑制剂组每次电针干预前1 h予外泌体抑制剂(GW4869)穴位注射(3 g/L,每穴50μL)。干预结束后，采用苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色观察损伤部位竖脊肌形态学变化，采用免疫组织化学染色法检测肌卫星细胞配对盒基因7(Pax7)、成肌分化因子(MyoD)蛋白表达，提取血清外泌体进行透射电子显微镜、纳米颗粒追踪分析技术鉴定，蛋白质印迹法检测竖脊肌中肌细胞生成素(MyoG)、肌球蛋白重链(MyHC)及凋亡连接因子2-相互作用蛋白X(Alix)、分化簇63(CD63)、肿瘤易感基因101(TSG101)蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组、电针组和电针+外泌体抑制剂组HE染色可见竖脊肌肌纤维断裂、变性、坏死和炎症细胞浸润，Masson染色可见胶原纤维增多；模型组MyoD、Pax7、MyoG、MyHC、CD63表达增加，TSG101表达下降(P<0.05);电针组MyoD、Pax7、Alix、TSG101表达增加，MyHC、CD63表达下降(P<0.05);电针+外泌体抑制剂组MyHC、Alix、TSG101表达升高，CD63表达下降(P<0.05)。与模型组比较，电针组和电针+外泌体抑制剂组HE染色可见肌纤维变性、坏死区域及炎症细胞浸润减少，Masson染色可见胶原纤维减少；电针组MyoD、Pax7、MyoG、Alix、TSG101表达升高，CD63表达下降(P<0.05);电针+外泌体抑制剂组Pax7、MyoG、MyHC、CD63表达降低，Alix、TSG101表达升高(P<0.05)。与电针+外泌体抑制剂组比较，电针组HE染色可见肌纤维变性和坏死区域较少、炎症细胞浸润减少，胶原纤维减少，MyoD、Pax7、MyoG、MyHC、Alix、CD63表达增加(P<0.05)。结论 电针“委中”“肾俞”可上调Pax7、MyoD的表达，促进竖脊肌再生修复，该作用机制可能与电针促进穴区外泌体的释放有关，外泌体可能是针刺效应启动的重要介导物质。

关键词

电针 / 穴位 / 外泌体 / 竖脊肌 / 损伤修复 / 大鼠

基金资助

国家自然科学基金面上项目(No.82174482); 广东省特支计划青年拔尖人才项目(No.0720240248); 广州地区中医药重大科技项目(No.2025CX001); 广东省第二中医院院内基金项目(No.SEZYY2023B17,No.SEZYY2024Z01)