基于NLRP3炎症小体探讨降糖3号方缓解糖尿病小鼠炎症反应的分子机制

摘要

目的 观察降糖3号方对2型糖尿病(T2DM)小鼠机体与肠道炎症反应及NLRP3炎症小体的影响，揭示其抗糖尿病的分子机制。方法 选取4周龄C57BL/6 N雄性小鼠，高脂饲料联合链脲佐菌素腹腔注射构建T2DM小鼠模型，将成模小鼠随机数字表法分成模型组、二甲双胍组、降糖3号方组，同时设置正常组。各组小鼠每日灌胃相应药液，二甲双胍组灌胃二甲双胍0.20 g/kg,降糖3号方组灌胃降糖3号方4.26 g/kg,正常组、模型组灌胃等量灭菌水，连续给药8周。药物干预结束后，酶联免疫吸附法检测血清及结肠组织中脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量，苏木素-伊红染色观察结肠组织病理形态，免疫组织化学法检测结肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、G蛋白偶联受体43(GPR43)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)蛋白表达，实时荧光PCR法检测结肠组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GPR43、ZO-1、Occludin mRNA表达。结果 各组间血清、结肠炎性因子表达差异具有统计学意义，与模型组比较，降糖3号方组LPS、TNF-α、IL-1β、IL-6表达降低(均P<0.05);降糖3号方可上调结肠中ZO-1、Occludin、GPR43的蛋白及mRNA表达，降低NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白及mRNA表达(均P<0.05),同时改善结肠组织病理损伤。结论 T2DM小鼠呈现慢性炎症反应状态，降糖3号方能够通过抑制NLRP3炎症小体，缓解T2DM小鼠机体与肠道炎症反应，修复肠黏膜屏障，这可能是其抗糖尿病的分子机制之一。

关键词

2型糖尿病 / 降糖3号方 / 炎症反应 / NLRP3炎症小体 / 肠黏膜屏障 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金项目(No.82174329); 北京中医药大学基本科研业务费揭榜挂帅项目(No.2023-JYB-JBZD-010); 国家中医药领军人才支撑计划-岐黄学者项目(No.1040063321005)