升麻环氧醇苷联合顺铂调控脂质代谢影响A549细胞增殖与凋亡的机制研究

摘要

目的 探究升麻环氧醇苷联合顺铂对肺癌A549细胞增殖与凋亡的作用及机制。方法 选择A549、BEAS-2B细胞系作为研究对象，采用CCK-8法检测升麻环氧醇苷、顺铂对A549细胞活力的影响，以及升麻环氧醇苷对BEAS-2B细胞活力的影响，计算半数抑制浓度(IC₅₀)和20%抑制浓度(IC₂₀);使用升麻环氧醇苷和顺铂对A549细胞的IC₂₀进行后续实验。将A549细胞分为对照组、顺铂组（5.09μmol/L）、升麻环氧醇苷组（4.39μmol/L）、顺铂+升麻环氧醇苷组（5.09μmol/L+4.39μmol/L）。4组细胞分别加入相应药物处理48 h后，采用EdU-488荧光探针法检测A549细胞阳性细胞率；膜联蛋白V/碘化丙啶染色法检测A549细胞凋亡情况；Bodipy 493/503染色法观察A549细胞脂滴生成；蛋白质印迹法检测A549细胞蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）、脂肪酸合成酶（FASN）、乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）、三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶（ACLY）、细胞周期蛋白E1（Cyclin E1）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、剪切型胱天蛋白酶-3（Cleaved-Caspase-3）蛋白表达；共聚焦免疫荧光法检测A549细胞SREBP1平均荧光强度。结果 升麻环氧醇苷对A549细胞的IC₅₀为（22.80±0.93）μmol/L、IC₂₀为（4.39±0.73）μmol/L,顺铂对A549细胞的IC₅₀为（31.57±1.53）μmol/L、IC₂₀值为（5.09±0.78）μmol/L。升麻环氧醇苷对BEAS-2B细胞的IC₅₀为（26.60±1.41）μmol/L。与对照组比较，顺铂组、升麻环氧醇苷组、顺铂+升麻环氧醇苷组EdU阳性细胞率降低，细胞坏死率和总凋亡率升高，脂滴生成减少，p-Akt、mTOR、SREBP1、FASN、ACC1、ACLY、Cyclin E1、CDK2、Bcl-2蛋白表达降低，Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高，SREBP1平均荧光强度降低（P<0.05）。与顺铂组比较，升麻环氧醇苷组细胞坏死率升高，脂滴生成减少，SREBP1、Cyclin E1、Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达降低，CDK2、Bcl-2蛋白表达升高（P<0.05）;顺铂+升麻环氧醇苷组细胞坏死率降低、总凋亡率升高，脂滴生成减少，p-Akt、mTOR、SREBP1、FASN、ACC1、ACLY、Cyclin E1、CDK2、Bcl-2蛋白表达降低，Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高，SREBP1平均荧光强度降低（P<0.05）。与升麻环氧醇苷组比较，顺铂+升麻环氧醇苷组细胞坏死率降低、总凋亡率升高，脂滴生成减少，p-Akt、mTOR、SREBP1、FASN、ACC1、ACLY、Cyclin E1、CDK2、Bcl-2蛋白表达降低，Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高，SREBP1平均荧光强度降低（P<0.05）。结论 升麻环氧醇苷联合顺铂可能通过抑制磷脂酰肌醇3激酶/Akt/mTOR信号通路，调控SREBP1表达，影响A549细胞脂质代谢途径，从而抑制其增殖。

关键词

升麻环氧醇苷 / 固醇调节元件结合蛋白1 / 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 / 肺腺癌细胞

基金资助

国家自然科学基金项目(No.82174254); 辽宁省科技计划联合项目(No.2023JH2/101700210); 辽宁省教育厅科技创新团队项目(No.LJ222510162018); 辽宁中医药大学中医药科技创新多学科交叉团队项目(No.2025-Dxkjc-15-02);辽宁中医药大学中西医结合学院“岐济”人才支撑计划项目(No.2023QJ01001)