探讨藿骨牡蛎方调节绝经后骨质疏松症大鼠破骨-成骨平衡的作用及其机制

摘要

目的 基于破骨-成骨平衡探讨藿骨牡蛎方（淫羊藿、骨碎补、生牡蛎）对绝经后骨质疏松症（PMOP）大鼠的防治作用及其机制。方法 将48只雌性SD大鼠按体质量分为假手术组、模型组、强骨胶囊组（0.054 g/kg）、碳酸钙组（1.670 g/kg）、藿骨牡蛎方低剂量组（0.188 g/kg）、藿骨牡蛎方高剂量组（0.375 g/kg）,每组8只。适应性喂养后，除假手术组仅切除卵巢附近等体积脂肪，其余大鼠以双侧卵巢去势手术建立PMOP模型。造模成功后灌胃相应药物，连续90 d。酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清雌二醇（E₂）、雌激素受体α（ERα）、Ⅰ型前胶原氨基端原肽（PINP）、抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）;比色法检测血清总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）;显微计算机断层成像检测大鼠股骨骨密度（BMD）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁分离度（Tb.Sp）和结构模型指数（SMI）,并观察松质骨显微结构；蛋白质印迹法检测大鼠股骨组织骨保护素（OPG）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、核因子κB受体激活因子（RANK）、叉头框蛋白O3α（FoxO3α）、Wnt2、β-连环蛋白（β-catenin）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白表达。结果 （1）强骨胶囊组与藿骨牡蛎方低、高剂量组大鼠血清E₂、ERα含量较模型组增加（P<0.05）。（2）与模型组比较，强骨胶囊组与藿骨牡蛎方高剂量组大鼠血清PINP、TRACP-5b含量下降（P<0.05）,PINP/TRACP-5b升高（P<0.05）。（3）与模型组比较，强骨胶囊组、碳酸钙组及藿骨牡蛎方低、高剂量组T-AOC、SOD、CAT活性升高，MDA含量下降（P<0.05）。（4）与模型组比较，强骨胶囊组及藿骨牡蛎方低、高剂量组大鼠BMD、Tb.Th、Tb.N增加，Tb.Sp、SMI降低（P<0.05）;碳酸钙组大鼠BMD增加，Tb.Sp降低（P<0.05）。（5）与模型组比较，强骨胶囊组及藿骨牡蛎方低、高剂量组大鼠RANKL、RANK、FoxO3α、PPARγ蛋白表达下降，OPG、Wnt2、β-catenin蛋白表达增加（P<0.05）。结论 藿骨牡蛎方可明显提高PMOP大鼠雌激素水平，抑制破骨细胞分化，降低骨吸收水平；缓解氧化应激，促进成骨分化、抑制成脂分化，提高骨形成水平，恢复破骨细胞与成骨细胞稳态平衡，从而达到防治PMOP的作用。此作用可能是通过OPG/RANKL/RANK及FoxO3α/Wnt2/β-catenin/PPARγ通路调节的。

关键词

绝经后骨质疏松症 / 藿骨牡蛎方 / 雌激素 / 骨形成 / 骨吸收 / 大鼠

基金资助

国家重点研发计划项目(No.2018YFC1706803)