葛花解酒涤脂汤对酒精性肝病小鼠肝脏组织能量代谢的影响

摘要

目的 检测酒精性肝病（ALD）小鼠肝脏组织能量代谢相关指标水平，并探讨葛花解酒涤脂汤的干预作用。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠任意分为正常对照组、模型组、葛花解酒涤脂汤高剂量组（4.94 g/kg）、葛花解酒涤脂汤低剂量组（2.47 g/kg）和白藜芦醇组（0.40 g/kg）,每组8只。除正常对照组外，其他各组小鼠先予Lieber-DeCarli对照液体饲料喂养5 d,随后予Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养10 d,第16天灌胃31.5%乙醇溶液1次，以制备ALD小鼠模型。造模结束后第2天起，各干预组灌胃相应药物，每日1次，连续9 d。苏木素-伊红染色和油红O染色观察肝脏组织脂肪变性情况；分光光度法检测肝脏组织Na⁺K⁺-腺苷三磷酸（ATP）酶、Ca²⁺Mg²⁺-ATP酶活性，琥珀酸脱氢酶（SDH）、肝糖原含量；反相高效液相色谱法检测肝脏组织ATP、腺苷二磷酸（ADP）和腺苷一磷酸（AMP）含量，以及AMP/ATP值、总腺苷酸池（TAN）含量、能荷值（EC）;实时荧光PCR法检测肝脏组织沉默信息调节因子1（SIRT1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）α2 mRNA表达；蛋白质印迹法检测肝脏组织SIRT1、AMPKα2、AMPKβ1蛋白表达。结果 与正常对照组比较，模型组小鼠肝脏组织脂肪变性病变明显，肝脏组织Ca²⁺Mg²⁺-ATP酶活性、SDH含量降低，肝糖原含量升高，EC、AMP/ATP值降低，ATP、ADP、AMP和TAN含量升高，SIRT1、AMPKα2 mRNA表达降低，AMPKβ1蛋白表达升高（均P<0.05）。与模型组比较，葛花解酒涤脂汤高、低剂量组肝脏组织脂肪变性明显减轻，肝脏组织Na⁺K⁺-ATP酶活性降低，EC及SIRT1、AMPKα2 mRNA表达升高（均P<0.05）;葛花解酒涤脂汤低剂量组Ca²⁺Mg²⁺-ATP酶活性、SDH及ATP含量升高（均P<0.05）;葛花解酒涤脂汤高剂量组AMP/ATP值升高（P<0.05）;葛花解酒涤脂汤高、低剂量组和白藜芦醇组肝脏组织SIRT1蛋白表达升高（均P<0.05）;葛花解酒涤脂汤低剂量组和白藜芦醇组AMPKα2蛋白表达升高（均P<0.05）。与葛花解酒涤脂汤高剂量组比较，葛花解酒涤脂汤低剂量组、白藜芦醇组肝脏组织ATP、TAN含量和EC升高，AMP/ATP值降低（均P<0.05）;葛花解酒涤脂汤低剂量组AMPKα2 mRNA表达降低（P<0.05）;白藜芦醇组SIRT1、AMPKα2蛋白表达升高（均P<0.05）。与葛花解酒涤脂汤低剂量组比较，白藜芦醇组AMPKβ1蛋白表达降低（P<0.05）。结论 慢性酒精摄入引起的能量代谢改变可能与小鼠ALD发生有关，葛花解酒涤脂汤干预可以改善ALD小鼠肝脏能量代谢异常。

关键词

酒精性肝病 / 葛花解酒涤脂汤 / 能量代谢 / 沉默信息调节因子1 / 腺苷酸活化蛋白激酶 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金地区基金项目(No.81660752); 贵州省基础研究计划项目(黔科合基础-ZK[2023]一般410)