探讨皮粘散调控Wnt4/β-catenin信号通路促进慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的作用机制

摘要

目的 探讨皮粘散调控Wnt4/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路促进慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的作用机制。方法 雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、皮粘散组、皮粘散去皮组、皮粘散皮部组、抑制剂组、皮粘散+抑制剂组，每组6只。除空白组外，其余各组采用埋置异物法制备慢性皮肤溃疡模型。造模术后，模型组以呋喃西林溶液清理创面，皮粘散组、皮粘散去皮组、皮粘散皮部组分别在小鼠皮肤创面涂抹对应药物0.1 g;抑制剂组腹腔注射3-(4-甲基苯基磺酰胺基)苯甲酸甲酯(MSAB)10 mg/kg;皮粘散+抑制剂组在小鼠皮肤创面涂抹皮粘散0.1 g,并腹腔注射MSAB(10 mg/kg)。每日1次，连续14 d。空白组不作处理。于给药的第1、3、7、14天记录创面愈合情况；HE染色法观察创面组织病理变化；免疫荧光法检测创面角蛋白10(CK10)、角蛋白14(CK14)、细胞增殖核抗原(Ki-67)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和β-catenin表达；蛋白质印迹法检测Wnt4及β-catenin蛋白表达情况。结果 与模型组比较，皮粘散组创面面积缩小，创面愈合率升高(P<0.05);CK10、CK14、Ki-67、α-SMA、β-catenin及Wnt4蛋白表达增加(P<0.05)。与皮粘散组比较，皮粘散皮部组和皮粘散去皮组创面愈合率降低(P<0.05)。皮粘散去皮组创面愈合率及CK10、CK14、Ki-67、α-SMA蛋白荧光表达均低于皮粘散皮部组(P<0.05)。与皮粘散组比较，皮粘散+抑制剂组创面愈合率降低，CK10、CK14、Ki-67、α-SMA、β-catenin及Wnt4蛋白表达降低(P<0.05)。结论 皮粘散可通过调节Wnt4/β-catenin信号通路促进小鼠慢性皮肤溃疡创面愈合，其中皮部药物(牛皮、桑白皮、地骨皮)在促进创面愈合的过程中发挥了关键作用，是中医学“以皮治皮”理论的具体应用。

关键词

慢性皮肤溃疡 / 皮粘散 / 创面愈合 / Wnt4/β-连环蛋白信号通路 / 法象药理 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金项目(No.82004380)