山茱萸醇提物调节LSD1/PSD95对Aβ_25-35诱导的阿尔茨海默病小鼠神经损伤保护作用的研究

摘要

目的 探究山茱萸醇提物通过调节组蛋白特异性去甲基化酶1（LSD1）/突触后致密蛋白-95（PSD95）影响神经元突触和神经炎症对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_25-35)诱导的阿尔茨海默病（AD）小鼠神经损伤的保护作用。方法 将40只C57BL/6N小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、山茱萸醇提物低剂量组（0.1 mg/g）及山茱萸醇提物高剂量组（0.3 mg/g）,每组10只。除假手术组外，其余各组双侧海马内注射Aβ_25-35构建AD小鼠模型。造模前7 d开始灌胃，手术后5 d继续灌胃，共60 d。Morris水迷宫实验、Y迷宫实验及旷场实验检测小鼠学习记忆和空间探索能力；蛋白质印迹法检测小鼠海马LSD1、PSD95、突触素（SYN）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白表达及组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化（H3K9me2）修饰水平；染色质免疫共沉淀（CHIP）结合实时荧光PCR法检测PSD95基因启动子区H3K9me2修饰水平及PSD95 mRNA水平；组织免疫荧光法检测H3K9me2和PSD95表达的相关性及海马组织内离子钙结合衔接分子1（IBA1）的表达。结果 山茱萸醇提物能明显改善Aβ_25-35诱导的阿尔茨海默病小鼠学习及记忆能力。与模型组比较，山茱萸醇提物明显缩短小鼠的逃避潜伏期，增加其自主活动次数和时间，改善其自发交替准确率，增加小鼠海马LSD1表达（均P<0.05）,进而降低PSD95基因启动子区H3K9me2修饰，因此，促进PSD95 mRNA转录和蛋白表达。组织免疫荧光结果表明，山茱萸醇提物降低海马中H3K9me2修饰水平会伴随着PSD95表达的增强。山茱萸醇提物亦能抑制小胶质细胞的活化，降低促炎因子IL-1β和TNF-α的表达。结论 山茱萸醇提物可能是通过上调LSD1表达，降低PSD95基因启动子区的H3K9me2修饰水平调节基因转录，增加突触可塑性调节的关键蛋白PSD95的表达，而缓解神经炎症反应、改善AD模型小鼠学习记忆功能障碍，从而对Aβ_25-35诱导的神经损伤发挥保护作用。

关键词

山茱萸 / 组蛋白特异性去甲基化酶1 / 组蛋白修饰 / 阿尔茨海默病 / 神经损伤 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金面上项目(No.82274612); 河南省博士后科研项目启动基金(No.HN2022100); 河南省高校科技创新团队支持计划(No.21IRTSTHN026)