基于正交设计与多模型综合评价的温和灸治疗早发性卵巢功能不全灸量参数优选

摘要

目的 基于正交设计与多模型综合评价观察不同灸量参数组合温和灸对早发性卵巢功能不全（POI）小鼠卵巢功能的整体效应。方法 采用L₉（3～4）正交表设计，以灸时（因素A）、灸距（因素B）、灸频（因素C）为3个因素，每个因素设3个水平，形成9个不同灸量参数组合温和灸干预组，即Ⅰ组～Ⅸ组。采用随机数字表法将SPF级雌性C57BL/6J小鼠分至各干预组，另设空白组与模型组，每组15只。除空白组外，采用雷公藤多苷（75 mg/kg）连续灌胃14 d制备POI模型。各干预组按正交表设定的参数，隔次交替温和灸双侧“肾俞”或“中脘”“关元”,连续14 d。采用阴道细胞涂片观察小鼠动情周期紊乱情况；酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清雌二醇（E₂）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、抗米勒管激素（AMH）、睾酮（T）含量；HE染色法观察小鼠卵巢组织形态并进行各级卵泡计数；合笼观察并计算小鼠妊娠率、着床数、活胎数及着床后死亡率。将动情周期紊乱率和FSH含量设为主要疗效指标，其余指标为次要疗效指标，通过极差分析、方差分析解析单指标效应，指标相关性权法（CRITIC）与熵权法确定各指标权重，结合逼近理想解排序法（TOPSIS）、灰色关联度分析进行综合评价，优选温和灸灸量参数。结果 与空白组比较，模型组动情周期紊乱率上升，血清E₂、AMH含量下降，FSH、LH、T含量升高，卵巢原始卵泡数、初级卵泡数、次级卵泡数、窦状卵泡数减少，闭锁卵泡数增加，妊娠率、着床数、活胎数减少，着床后死亡率增加（P<0.05）。与模型组比较，各干预组指标均有不同程度改善。综合正交试验、CRITIC-TOPSIS法、熵权-TOPSIS法与灰色关联度分析筛选出Ⅳ组（灸时10 min、灸距1 cm、1次/d）为优选灸量参数组合。该组可降低动情周期紊乱率，增加血清E₂、AMH含量，降低FSH、LH、T含量，增加原始卵泡数、初级卵泡数、次级卵泡数，减少闭锁卵泡，提高妊娠率、着床数、活胎数（P<0.05）。结论 灸时10 min、灸距1 cm、1次/d的灸量参数组合是温和灸改善POI模型小鼠卵巢功能与生育能力的优选方案。

关键词

温和灸 / 灸量参数 / 早发性卵巢功能不全 / 正交设计 / 小鼠

基金资助

国家自然科学基金项目(No.82374599); 江苏省中医药领军人才培养项目(No.SLJ0316); 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(No.KYCX25＿2318)