左归降糖解郁方调控CD300f/GLUT1信号通路改善糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元突触损伤的作用机制

刘检; 唐林; 赵洪庆; 姜帆; 刘林; 胡超

北京中医药大学学报 ›› 2024, Vol. 47 ›› Issue (11) : 1573 -1584.

刘检, 唐林, 赵洪庆, 姜帆, 刘林, 胡超

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摘要

目的基于白细胞单免疫球蛋白样受体3(CD300f)/葡萄糖转运体1(GLUT1)信号通路介导小胶质细胞糖代谢，探讨左归降糖解郁方改善糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元突触损伤的作用机制。方法 80只雄性SD大鼠按照随机数字表法选取10只大鼠作为正常组，其余70只高脂饲料喂养4周后单次尾静脉注射链脲佐菌素(38 mg/kg)复制大鼠糖尿病模型，筛选造模成功的大鼠60只，按随机数字表法分为模型组、CD300f阻断剂组、CD300f激动剂组、二甲双胍+氟西汀组(二甲双胍0.18 g/kg+氟西汀1.8 mg/kg)和左归降糖解郁方高、低剂量组(20.52、10.26 g/kg)。除正常组外，其余各组大鼠予28 d慢性不可预知温和应激加孤养复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型。其中，二甲双胍+氟西汀组与左归降糖解郁方高、低剂量组在造模第2周后连续灌胃相应药物，正常组、模型组灌胃等体积蒸馏水，连续14 d; CD300f阻断剂组、激动剂组则进行海马区微量注射给药，分别注射髓系细胞触发受体抑制因子(CLM1,2μg/kg)和免疫球蛋白Fc段表面蛋白(Fcγ,5μg/kg),每周1次。干预结束后，采用旷场实验、强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为；生化分析检测大鼠海马组织葡萄糖、乳酸含量及腺苷二磷酸(ADP)/三磷酸腺苷(ATP);采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠海马组织胰岛素、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)水平；采用免疫荧光检测海马组织CD300f、GLUT1、突触相关前膜蛋白3(RIMS3)、突触后膜相关蛋白102(SAP102)平均荧光强度；蛋白质印迹法检测大鼠海马组织CD300f、GLUT1、RIMS3、SAP102蛋白表达情况；采用尼氏染色和透射电镜观察大鼠海马组织病理改变。结果与正常组比较，模型组大鼠旷场总活动路程减少、强迫游泳不动时间增加，海马组织葡萄糖、乳酸含量及ADP/ATP升高、胰岛素水平降低、5-HT和DA水平下降，海马组织CD300f、GLUT1、RIMS3、SAP102平均荧光强度及蛋白相对表达量均降低(均P<0.05),海马神经元突触超微结构受损。与模型组比较，CD300f激动剂组及左归降糖解郁方高、低剂量组上述抑郁样行为学改变、糖代谢和单胺神经递质失衡得到改善(均P<0.05);CD300f激动剂组及左归降糖解郁方高剂量组海马CD300f、GLUT1、RIMS3、SAP102平均荧光强度和蛋白相对表达量均升高(均P<0.05),突触损伤减轻；CD300f阻断剂组葡萄糖、乳酸、ADP/ATP、5-HT异常及CD300f蛋白表达异常情况加重(均P<0.05),突触损伤加重。结论左归降糖解郁方能有效缓解糖尿病并发抑郁症大鼠海马小胶质细胞糖代谢异常与神经元突触损伤，其机制可能与调控CD300f/GLUT1信号通路有关。