Rspo3/Lgr5促进N-钙黏蛋白表达参与小鼠肝损伤

摘要

目的 本文旨在研究在损伤肝组织中，特异性顶部盘状底板反应蛋白3(R-spondin3, Rspo3)上调周细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin, Ncad,基因名Cdh2)表达，从而参与小鼠肝损伤。方法 采用反转录实时定量聚合酶链反应法(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)测定Rspo3,小鼠肝组织富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)和Cdh2 mRNA表达情况；采用蛋白质免疫印迹方法以及免疫荧光染色方法测定Ncad定位以及表达情况；分离并培养小鼠原代骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal stromal cell, BMSC),采用靶向Lgr5的RNA干扰实验以确定Rspo3是否通过作用于Lgr5上调Ncad表达。结果 在损伤小鼠肝组织中，Rspo3及其受体Lgr5显著上调；肝损伤时黏附连接蛋白Ncad表达上调，且与Rspo3及Lgr5表达量呈正相关；Ncad主要定位于损伤肝脏的周细胞；使用Rspo3处理小鼠原代BMSC能够上调Ncad表达，Lgr5 siRNA能使Ncad水平下降。结论 在小鼠损伤肝组织中，Rspo3通过作用于受体Lgr5,上调周细胞中Ncad表达，从而影响小鼠肝损伤。

关键词

肝损伤 / N-钙黏蛋白 / 特异性顶部盘状底板反应蛋白3 / 富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5