人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响

摘要

目的 采用慢速冷冻方法，以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心标准冻融方案，评估人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响。方法 将12例患者的卵巢组织分为新鲜卵巢组织组和冻融卵巢组织组，冻融方案为本中心标准方案，通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法和钙黄绿素AM(calcein acetoxymethylester, calcein-AM)染色进行卵泡计数并评估卵泡活性，免疫组织化学法标记Ki-67和caspase-3的阳性率，评估细胞增殖和凋亡情况，Western blotting法比较两组在caspase-3、bax、FasL等凋亡相关蛋白的表达。结果 采用本中心标准冻融方案，卵巢组织冻融前后在卵泡计数和卵泡活性方面差异无统计学意义(P>0.05);卵巢组织冻融后细胞Ki-67阳性率低于新鲜卵巢组织(P<0.05),差异有统计学意义；两组caspase-3阳性率差异无统计学意义(P>0.05);冻融后caspase-3蛋白表达量高于新鲜卵巢组织，差异有统计学意义(P<0.05);而bax和FasL等凋亡相关蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采用本中心标准冻融方案，能够很好地保持卵巢组织内的卵泡数目、形态和活性，冻融后细胞增殖水平降低，不增加冻融后bax和FasL等凋亡相关蛋白的表达，caspase-3的表达量相对增加，是较好的人卵巢组织冻融方案。

关键词

卵巢组织 / 冻融方案 / 卵泡活性 / 凋亡相关蛋白 / 生育力保护 / 卵泡损伤

基金资助

国家自然科学基金项目(82101822); 北京市属医院科研培育计划项目(PX2021053); 首都医科大学附属北京妇产医院中青年学科骨干培养专项(FCYY202015); 首都医科大学校培育基金(PYZ20058); 北京市自然科学基金项目(7202047)