免疫缺陷鼠和非免疫缺陷鼠切牙稳态维持和损伤修复比较

摘要

目的 探究免疫缺陷鼠和非免疫缺陷鼠在切牙稳态维持和损伤修复的过程对切牙生长速度、矿化的影响以及免疫的参与情况，为临床再生医学提供新的思路和理论基础。方法 选用8～10周龄雄性BALB/c Nude小鼠（n=10）,BALB/c小鼠（n=10）和C57BL/6J小鼠（n=10）,通过机械方法构建切牙损伤修复模型，连续3 d在每天固定的时间测量各组鼠断牙侧、非断牙侧和正常对照侧切牙长度，计算其生长速度，检测免疫反应变化，组织形态学分析对比牙体硬组织矿化程度；实时荧光定量反转录聚合酶链式反应（real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, RT-qPCR）,免疫组化（immunohistochemistry, IHC）和免疫荧光（immunofluorescence, IF）法检测小鼠颈环处免疫相关细胞因子受体的表达和干细胞增殖情况等。结果 BALB/c Nude小鼠无论是在稳态维持还是切牙损伤情况下，其切牙生长速度均慢于BALB/c和C57BL/6J小鼠（P<0.05）,提示免疫反应可能参与小鼠切牙的修复再生过程。小鼠切牙生长速度夜间明显快于昼间。切牙损伤刺激牙齿加速生长（P<0.05）,且断牙侧颈环处干细胞增殖水平升高，SOX2⁺干细胞和Ki67⁺细胞数量增加（P<0.05）。组织学染色显示，断牙侧牙体硬组织矿化程度低于非断牙侧和正常对照侧（P<0.05）,与其修复相关的Dspp、Ambn的mRNA表达增强（P<0.05）。IF结果显示Th2细胞因子IL4受体（interleukin 4 receptor alpha, IL4rα）的表达显著高于非断牙侧和正常对照侧，相关mRNA表达也与其一致。结论 损伤会加速切牙生长速度，刺激颈环干细胞增殖和分化。初期修复的硬组织矿化程度低。T细胞缺乏可能影响切牙的稳态维持和修复再生能力，Ⅱ型免疫细胞因子受体IL4rα的高表达与修复过程密切相关，其具体功能机制有待进一步研究。

关键词

损伤修复 / 小鼠切牙生长 / 颈环 / 矿化 / 免疫 / 再生