橄榄苦苷调节PRAS40/mTORC1信号通路对噪声性耳聋大鼠耳蜗组织损伤的影响

摘要

目的 研究橄榄苦苷调节脯氨酸蛋白激酶底物蛋白(PRAS40)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路对噪声性耳聋(NIHL)大鼠耳蜗组织损伤的影响。方法 总共选取48只大鼠，随机选出12只大鼠作为对照组，剩余大鼠采用白噪声来构建NIHL大鼠模型。随后将NIHL模型大鼠随机分为模型组、橄榄苦苷组、橄榄苦苷+NV-5138组，每组12只。各组给予相应干预7 d。检测大鼠的听性脑干反应(ABR)阈值；HE染色检测大鼠耳蜗组织病理损伤；原位末端标记法染色观察大鼠耳蜗组织细胞凋亡情况；共聚焦显微镜观察耳蜗组织基底膜毛细胞序列变化；蛋白印迹法检测大鼠耳蜗组织磷酸化PRAS40(p-PRAS40)、PRAS40、磷酸化mTORC1(p-mTORC1)、mTORC1、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组耳蜗组织螺旋神经节细胞数目明显减少，形态异常，基底膜毛细胞结构损坏严重，未见明显的界限，细胞排列不整齐，ABR阈值、耳蜗组织凋亡细胞数目、p-mTORC1/mTORC1蛋白比值、Bax蛋白表达显著升高，p-PRAS40/PRAS40蛋白比值显著降低(P<0.05)。与模型组比较，橄榄苦苷组耳蜗组织螺旋神经节细胞数目增加，且形态有所恢复，基底膜毛细胞损伤减轻，细胞排列逐渐恢复正常，界限逐渐清晰，ABR阈值、耳蜗组织凋亡细胞数目、p-mTORC1/mTORC1蛋白比值、Bax蛋白表达显著降低，p-PRAS40/PRAS40蛋白比值显著升高(P<0.05)。NV-5138干预后减弱了橄榄苦苷对NIHL大鼠耳蜗组织病理损伤、基底膜毛细胞序列和上述指标的改善作用(P<0.05)。结论 橄榄苦苷可能通过调控PRAS40/mTORC1信号通路，促进PRAS40磷酸化，抑制mTORC1磷酸化，从而减轻NIHL大鼠耳蜗组织损伤。

关键词

耳蜗 / 橄榄苦苷 / 脯氨酸蛋白激酶底物蛋白 / 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 / 噪声性耳聋 / 组织损伤