过表达lncRNA HCG11调控线粒体自噬抑制喉癌细胞恶性生物学行为的机制研究

摘要

目的 探讨长链非编码RNA HLA复合物11组(lncRNA HCG11,简称HCG11)对HEp-2喉癌细胞恶性生物学行为的影响及机制。方法 利用质粒转染技术将人喉表皮样癌HEp-2细胞分为HCG11对照组和过表达组，人鼻咽上皮NP69细胞作为正常组；采用定量聚合酶链式反应(qPCR)检测HCG11在3组细胞中表达情况。通过克隆形成实验检测HEp-2细胞生长；划痕实验检测HEp-2细胞迁移；Annexin V/PI染色检测HEp-2细胞凋亡；DCFH-DA荧光探针染色检测HEp-2细胞内活性氧(ROS);透射电镜观察细胞内线粒体形态；Western blot分析细胞中PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62蛋白表达。结果 qPCR结果显示，喉癌细胞比正常细胞HCG11水平表达更低，且成功构建喉癌细胞HCG11过表达模型。与对照组比较，HCG11过表达组HEp-2细胞增殖、迁移及凋亡均被抑制(P<0.05);细胞内ROS水平升高(P<0.05);细胞内线粒体形态受损；细胞PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平升高，p62蛋白水平降低(P<0.05)。结论 LncRNA HCG11在HEp-2喉癌细胞中表达下调，HCG11过表达可抑制HEp-2喉癌细胞增殖、迁移及凋亡，其机制可能与激活PINK1/Parkin信号通路，从而调控细胞内线粒体发生过度自噬相关。

关键词

喉癌 / 长链非编码RNA / HCG11 / 线粒体自噬