与GRP78相关的miR-15a-5p在鼻咽癌放疗抵抗中的作用

摘要

目的 探究与葡萄糖调节蛋白78(GRP78)相关的非编码微小RNA-15a-5p(miR-15a-5p)在鼻咽癌放疗抵抗中的作用并初步探索二者之间的调控机制。方法 应用shRNA技术干扰鼻咽癌细胞GRP78表达，通过miRNA芯片筛选与GRP78相关miRNA,并结合RT-PCR实验验证敲低后miR-15a-5p表达水平；在鼻咽癌细胞系中瞬转miR-15a-5p相应的模拟物和抑制剂后验证miR-15a-5p在鼻咽癌放疗抵抗中的作用；通过生物信息学初步分析GRP78调控miR-15a-5p的可能分子机制。结果 建立的鼻咽癌放射抵抗细胞系C666-IR对放射的抵抗性强于母本细胞C666-1,且GRP78蛋白的表达更高，分布更广；C666-IR细胞中miR-15a-5p的表达高于C666-1细胞，且GRP78高表达的鼻咽癌细胞经射线照射后miR-15a-5p仍维持较高水平，而敲低GRP78可以降低鼻咽癌细胞的miR-15a-5p水平；瞬转miR-15a-5p模拟物增强C666-1细胞的迁移能力和放射抵抗性，瞬转miR-15a-5p抑制剂降低C666-IR细胞的迁移能力和放射抵抗性；生物信息学分析预测miR-15a-5p基因启动子460位点左右区域与转录因子结合可能性最大，且预测到13个可能的转录因子，其中STAT4和FOXP3可能性最大。结论 GRP78介导miR-15a-5p表达上调促进鼻咽癌放疗抵抗，其调控机制可能为GRP78通过驱动转录因子STAT4/FOXP3提高miR-15a-5p表达，靶向miR-15a-5p可能为放疗抵抗的鼻咽癌提供新的治疗策略。

关键词

鼻咽癌 / 葡萄糖调节蛋白78 / 微小RNA-15a-5p / 放疗抵抗

基金资助

国家自然科学基金面上项目(82273486)