连翘苷调控miR-34c-5p表达对鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2凋亡的影响及作用机制分析

摘要

目的 探究连翘苷通过调控微小RNA-34c-5p(miR-34c-5p)表达对鼻咽癌(NPC)细胞系CNE-1、CNE-2增殖抑制及凋亡诱导的影响及其作用机制。方法 体外培养NPC细胞CNE-1、CNE-2,采用MTT法筛选连翘苷对NPC细胞增殖的作用浓度。将CNE-1、CNE-2细胞分别分为对照组、连翘苷组、阴性对照模拟物(miR-NC)组、miR-34c-5p模拟物(miR-34c-5p)组、连翘苷+阴性对照抑制剂(in-miR-NC)组和连翘苷+miR-34c-5p抑制剂(in-miR-34c-5p)组。采用集落形成实验、EdU法、TUNEL法及流式细胞术检测各组细胞的增殖与凋亡情况，利用Western blot检测各组NPC细胞增殖与凋亡相关蛋白的表达。结果 CNE-1和CNE-2细胞增殖活力随着连翘苷浓度的升高呈剂量依赖性降低(P<0.05),8μmol/L连翘苷对CNE-1和CNE-2细胞增殖活力的抑制率接近50%。与对照组比较，连翘苷组CNE-1和CNE-2细胞中miR-34c-5p表达、TUNEL阳性细胞率、细胞凋亡率、p53水平及FasL水平均显著升高，集落形成、EdU阳性细胞比例、c-Myc、PCNA、Survivin均降低(P<0.05);与miR-NC组比较，miR-34c-5p组CNE-1和CNE-2细胞中miR-34c-5p表达、TUNEL阳性细胞率、细胞凋亡率、p53水平、FasL水平均升高，集落形成、EdU阳性细胞比例、c-Myc、PCNA、Survivin均降低(P<0.05);与连翘苷+in-miR-NC组比较，连翘苷+in-miR-34c-5p组CNE-1和CNE-2细胞中miR-34c-5p表达、TUNEL阳性细胞率、细胞凋亡率、p53水平、FasL水平均降低，集落形成、EdU阳性细胞比例、c-Myc、PCNA、Survivin均升高(P<0.05)。结论 连翘苷可通过上调miR-34c-5p表达，有效抑制NPC细胞CNE-1和CNE-2增殖并促进细胞凋亡。

关键词

鼻咽癌细胞 / 连翘苷 / miR-34c-5p / 增殖 / 凋亡