miR-29a靶向调控COL6A6对垂体腺瘤细胞增殖和侵袭的影响及其与患者预后的相关性

摘要

目的 探讨miR-29a靶向调控胶原蛋白VIA6（COL6A6）在垂体腺瘤（PA）发生、发展过程中的作用机制及其与患者预后的相关性。方法 选取2022年3月—2023年3月昆明医科大学第一附属医院鼻颅底外科收治的非侵袭性垂体腺瘤（NIPA）患者25例和侵袭性垂体腺瘤（IPA）患者25例。采用逆转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、Western blot检测两组患者PA组织及正常垂体细胞、PA细胞系（AtT-20、HP75）中miR-29a、COL6A6的表达水平，将miR-29a mimic、miR-29a inhibitor和对照miRNA mimic、miRNA inhibitor分别转染至PA细胞系中，通过RT-qPCR检测转染后miR-29a、COL6A6的表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a与COL6A6之间存在结合位点关系；CCK-8检测细胞增殖能力；使用SPSS 27.0统计软件分析miR-29a表达差异与IPA的相关性以及其临床诊断预后价值。结果 miR-29a在IPA组织中的表达显著高于NIPA组织，差异具有统计学意义（P<0.001）;与正常垂体细胞（MPC）相比，miR-29a在PA细胞系（AtT-20、HP75）中均呈高表达，差异具有统计学意义（P<0.01）;miR-29a与COL6A6呈负相关的靶向结合关系。miR-29a过表达可促进PA细胞的增殖与侵袭；miR-29a的表达水平与肿瘤大小（χ²=4.056,P=0.021）、Knosp分级（χ²=25.873,P<0.001）、肿瘤全切率（χ²=4.903,P=0.027）密切相关。ROC曲线分析显示，miR-29a表达水平评估PA的不良预后具有一定价值（AUC=0.779,95%CI:0.638～0.920）;Kaplan-Meier生存曲线显示，miR-29a低表达组与高表达组患者复发率分别为13.0%、51.9%,差异具有统计学意义（HR=3.882,95%CI:1.45～10.39,P=0.0069）;多因素非条件Logistic回归分析显示，肿瘤全切率（OR=0.009,95%CI:0.001～0.184,P=0.002）、miR-29a表达水平（OR=15.325,95%CI:1.147～204.716,P=0.039）是影响PA患者预后的独立危险因素。结论 miR-29a通过靶向调控COL6A6促进PA细胞增殖与侵袭，这一靶向调控通路可能是PA发生、发展及侵袭性表型形成的重要分子机制；同时，miR-29a是影响PA患者预后的独立危险因素，对评估患者不良预后具有可靠价值，可能为该疾病的诊断和治疗提供新的分子标志物和治疗靶点。

关键词

垂体腺瘤 / miR-29a / COL6A6 / 增殖 / 侵袭 / 预后

基金资助

国家自然科学基金(82160513); 云南省科技厅-昆明医科大学联合专项(202101AY070001-082); 云南省建设面向南亚东南亚科技创新中心专项(202303AP140005)