麻醉药布比卡因对卵巢癌干细胞样细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键分子的影响

摘要

目的 观察麻醉药布比卡因对卵巢癌干细胞样细胞(Ovarian cancer stem-like cells, OCSLCs)中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键分子的影响。方法 取SKOV3细胞系细胞进行体外培养，通过悬浮培养法获得OCSLCs,采用不同浓度(1μM、10μM、100μM、1 mM)布比卡因处理OCSLCs,分为1μM组、10μM组、100μM组及1 mM组，并设置空白对照组与安慰剂对照组(同等剂量浓度0.9%生理盐水处理),采用免疫组化法检测各组Wnt3a、β-catenin、细胞周期素D1(Cyclin D1)、存活素(Survivin)蛋白表达水平，采用Western-blot实验检测各组Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1及Survivin表达量，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测各组Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1及Survivin mRNA相对表达水平，采用MTS法检测各组细胞存活率，采用细胞划痕实验测定各组细胞迁移能力。结果 Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1、Survivin蛋白表达评分：1 mM组<100μM组<10μM组<1μM组<空白对照组与安慰剂对照组(P<0.05),空白对照组与安慰剂对照组比较无显著差异(P>0.05);Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1、Survivin蛋白表达水平：1 mM组<100μM组<10μM组<1μM组<空白对照组与安慰剂对照组(P<0.05),空白对照组与安慰剂对照组比较无显著差异(P>0.05);Wnt3a mRNA、β-catenin mRNA、Cyclin D1 mRNA、Survivin mRNA水平及细胞迁移能力：1 mM组<100μM组<10μM组<1μM组<空白对照组与安慰剂对照组(P<0.05),空白对照组与安慰剂对照组比较无显著差异(P>0.05);1 mM组细胞存活率显著低于其余3组(P<0.05),100μM组细胞存活率显著低于10μM组与1μM组(P<0.05),10μM组细胞存活率显著低于1μM组(P<0.05)。结论 布比卡因可降低OCSLCs中Wnt/β-catenin信号通路Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1、Survivin蛋白表达水平，且布比卡因浓度越高作用越明显。

关键词

卵巢癌 / 布比卡因 / 肿瘤干细胞 / Wnt / β-连环蛋白