破骨细胞条件性Tsc1敲除小鼠模型构建

摘要

目的 基于Cre-loxp重组酶系统，构建破骨细胞特异性Tsc1基因条件性敲除（cKO）小鼠模型，为深入研究Tsc1基因在骨质疏松症及其他骨代谢性疾病中的分子机制提供可靠的实验动物模型。方法 将Ctsk^Cre/+小鼠与Tsc1^flox/flox小鼠进行交配与筛选，获得实验组(Ctsk^Cre/+/Tsc1^flox/flox)及其同窝对照的野生型小鼠。采用碱裂解法提取小鼠基因组DNA,并通过PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定。提取总蛋白后采用Western blot技术在蛋白水平检测TSC1蛋白的表达情况。结果 成功获得基因型为Ctsk^Cre/+/Tsc1^flox/flox的纯合子小鼠。Western blot分析进一步证实，与野生型对照组相比，该模型小鼠在原代破骨细胞中TSC1蛋白的表达水平显著降低，表明破骨细胞中Tsc1基因的表达被有效敲除。结论 成功构建了破骨细胞特异性Tsc1条件性敲除小鼠模型，并从基因型和蛋白水平验证。该模型的建立为后续深入探讨Tsc1基因在调控骨重塑以及在骨质疏松症等骨相关疾病中的具体作用机制奠定了关键的实验基础。

关键词

破骨细胞 / TSC1 / 条件性敲除小鼠

基金资助

吉林省科技厅自然科学基金(YDZJ202301ZYTS040); 广东省医学科学技术研究基金(B2024037);广东省医学科学技术研究基金(B2021163)