4种哺乳动物细胞LRRC8A的表达及其生理特性的研究

摘要

目的 研究4种哺乳动物细胞(人结肠癌细胞、人前列腺癌细胞、大鼠甲状腺滤泡上皮细胞、人卵巢癌细胞)中容积调控性阴离子通道LRRC8A的表达及其生理特性。方法 RT-PCR检测LRRC8A在mRNA水平的表达，切胶回收PCR扩增产物进行基因测序并与比对；LRRC8A在蛋白质水平的表达应用Western Blot检验；构建YFP-H148Q/I152L真核表达载体，稳定转染至FRT细胞，荧光淬灭动力学实验验证低渗状态下LRRC8A的阴离子转运特性。结果 RT-PCR及Western Blot表明以上4种哺乳动物细胞在mRNA和蛋白质水平均表达LRRC8A,基因测序结果经比对后显示被测序列与标准参考序列完全匹配。荧光淬灭动力学实验证实低渗状态下LRRC8A可转运阴离子，具有转运阴离子生理特性。结论 4种哺乳动物细胞(人结肠癌细胞、人前列腺癌细胞、大鼠甲状腺滤泡上皮细胞、人卵巢癌细胞)表达LRRC8A,LRRC8A具有经典的容积调控性阴离子通道的特性。

关键词

LRRC8A / 容积调控性阴离子通道 / 哺乳动物细胞 / FRT细胞