高氧诱导大鼠肺泡Ⅱ型细胞内质网自噬与其功能的关系

摘要

目的 探讨不同时间高浓度氧对肺泡Ⅱ型细胞（AECII）内质网自噬与肺泡表面活性物质产生功能之间的关系。方法 将大鼠RLE-6TN细胞分为对照组（C组，21%O₂常规培养72 h）、高氧H1、H2、H3、H4组（95%O₂分别培养12、24、48、72 h）。实时荧光定量PCR法检测内质网自噬受体ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的mRNA水平，Western blot法检测内质网自噬相关蛋白ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的水平，ELISA法检测各组二棕榈酰卵磷脂（DPPC）水平。结果 与C组相比，H1组ATL3、SEC62的mRNA水平、CCPG1的蛋白水平、DPPC产量下降（P<0.05）,CCPG1、FAM134B、RTN3的mRNA水平、ATL3、FAM134B、RTN3、SEC62的蛋白水平显著下降（P均<0.01）;H2组ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的mRNA水平、ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的蛋白水平差异无统计学意义（P均>0.05）,DPPC产量增高（P<0.05）;H3、H4组ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的mRNA水平、ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3、SEC62的蛋白水平、DPPC产量显著下降（P均<0.01）。与H1组相比，H2组CCPG1、FAM134B的mRNA水平、ATL3、RTN3的蛋白水平、DPPC产量显著增高（P<0.01）,SEC62的蛋白水平增高（P<0.05）;H3组ATL3、SEC62的蛋白水平显著下降（P<0.01）,RTN3的mRNA水平、RTN3的蛋白水平下降（P<0.05）;H4组ATL3的mRNA水平、CCPG1的蛋白水平下降（P<0.05）、RTN3的mRNA水平、ATL3、RTN3、SEC62的蛋白水平显著下降（P<0.01）。与H2组相比，H3组、H4组ATL3、CCPG1、FAM134B、RTN3的mRNA水平、ATL3、RTN3、SEC62的蛋白水平、DPPC产量显著下降（P均<0.01）;H4组SEC62的mRNA水平下降（P<0.05）;H3组CCPG1、FAM134B的蛋白水平下降（P<0.05）;H4组CCPG1、FAM134B的蛋白水平显著下降（P<0.01）;与H3组相比，H4组ATL3、RTN3、SEC62的蛋白水平显著下降（P<0.01）;其余各组差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 高氧12 h AECII内质网自噬水平、DPPC产量下降；高氧24 h AECII内质网自噬水平恢复到基础值，DPPC产量达到峰值，48 h后内质网自噬水平、DPPC产量再次下降，72 h后AECII内质网自噬水平、DPPC产量衰减仍保持较低水平，AECII内质网自噬与其功能密切相关。

关键词

高氧 / 内质网自噬 / 肺泡Ⅱ型上皮细胞 / 二棕榈酰卵磷脂