蒙药乌力地格调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制肝门部胆管癌裸鼠移植瘤的机制研究

摘要

目的 探索蒙药乌力地格对肝门部胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠的作用效果并同时研究其作用效果与PI3K/AKT/mTOR信号通路的关系。方法 用QBC939细胞在裸鼠皮下造模成功后，随机将荷瘤裸鼠分为吉西他滨组、生理盐水空白对照组、二甲基亚砜(Dimethy sulfoxide, DMSO)溶剂对照组、乌力地格组。按照分组情况给药，并且记录各组移植瘤体积及荷瘤裸鼠重量变化。连续给药15天，眼球采血后处死荷瘤裸鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤标记物CEA、CA19-9的含量。取部分荷瘤裸鼠肿瘤组织进行HE染色及免疫组织化学法观察肿瘤细胞的染色情况、结构形态、坏死程度，以及PI3K、AKT、mTOR蛋白的表达情况；其余肿瘤组织通过qRT-PCR测定PI3K、AKT、mTOR的RNA相对表达量。结果 (1)通过测量各个组移植瘤体积，发现与生理盐水组和DMSO组相比，乌力地格组肿瘤体积较小，差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比，肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05)。(2)通过比较各个组荷瘤裸鼠体重，发现与吉西他滨组相比，乌力地格组体重较大，差异有统计学意义(P<0.05);与生理盐水组相比，乌力地格组体重较小，差异有统计学意义(P<0.05);而乌力地格组与DMSO组相比，体重差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与生理盐水组及DMSO组相比，乌力地格组的血清CEA、CA19-9含量均较低，差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比，CEA、CA19-9含量差异无统计学意义(P>0.05)。(4)HE染色验证造模成功后用免疫组织化学染色法检测，发现与生理盐水组、DMSO组相比，乌力地格组PI3K、AKT、mTOR蛋白均表达下降，差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。(5)qRT-PCR检测显示，与生理盐水组和DMSO组相比，乌力地格组中PI3K、AKT、mTOR的RNA相对表达量下降，差异有统计学意义(P<0.05);而乌力地格组与吉西他滨组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 乌力地格对肝门部胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠生长具有抑制作用且其抑制作用可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词

肝门部胆管癌 / PI3K/AKT/mTOR / QBC939