miR-3917通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞的增殖和迁移

摘要

目的 探究miR-3917在结肠癌(Colorectal cancer, CRC)细胞增殖和迁移中的作用及相关信号通路机制。方法 应用GEO2R分析工具对miRNA表达数据集(GSE101502)进行比较分析，获取在CRC组织中差异表达的miRNA。在TCGA数据库的样本表达数据中验证目的miRNA的表达水平。进一步通过qPCR检测miR-3917在人正常结肠细胞系(CCD841 CoN)和CRC细胞系(HCT 116)中的表达水平。通过在HCT 116细胞中转染miR-3917的模拟物(miR-mimic)上调其表达，并利用qPCR检测验证。通过CCK-8实验和平板克隆形成实验检测细胞的增殖。通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移。通过TargetScan对miR-3917的靶基因进行预测并利用DAVID数据库对其进行富集分析。通过Western blot检测β-catenin核蛋白的表达以评价Wnt/β-catenin信号通路的激活水平。结果 共有21个差异表达的miRNA(Log2│Fold Change│>1,P<0.05),其中与正常组织相比较，CRC组织中上调的有2个，下调的有19个。miR-3917在CRC组织中的表达显著下降(P<0.05)。与CCD841 CoN细胞系相比，HCT 116细胞中miR-3917的表达显著降低(P<0.05)。在HCT 116细胞中转染miR-mimic可以显著上调miR-3917的表达(P<0.05)。与对照组相比，miR-mimic组中HCT 116细胞的增殖(CCK-8实验，P<0.05;平板克隆形成实验，P<0.05)和迁移(划痕实验，P<0.05;Transwell实验，P<0.05)能力显著下降。与对照组相比，miR-mimic组中HCT 116细胞Wnt/β-catenin信号通路被显著抑制(P<0.05)。结论 miR-3917通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制CRC细胞的增殖和迁移能力，这为CRC的治疗提供了潜在新靶点。

关键词

miR-3917 / Wnt/β-catenin信号通路 / 结肠癌 / 细胞增殖 / 细胞迁移