利多卡因对脂多糖诱导的HK-2细胞炎症反应及TLR4/NF-κB通路的影响

摘要

目的 探讨利多卡因对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的脓毒症肾损伤的保护作用及机制。方法 将肾小管上皮细胞(HK-2)分为空白对照组、LPS组和LPS+利多卡因组。细胞增殖与毒性试剂(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HK-2细胞炎症因子高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平，比较各组间上述指标的差异，采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测各组HK-2细胞关键蛋白Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达。结果 CCK-8检测结果显示，20μg/mL的利多卡因能使LPS诱导24 h后的HK-2细胞生存率提高73%,LPS诱导HK-2细胞24 h后，TLR4、NF-κB p65蛋白表达均显著高于空白对照组，HMGB1、IL-6、TNF-a水平也均显著高于空白对照组；而与LPS组比较，20μg/mL利多卡因可明显降低TLR4、NF-κB p65的蛋白表达，也能明显降低HMGB1、IL-6、TNF-a水平。结论 20μg/mL利多卡因可显著降低LPS诱导的HK-2细胞中促炎性细胞因子的释放，同时还可显著下调炎症通路蛋白TLR4、NF-κB的表达，从而发挥对LPS诱导的SA-AKI模型HK-2细胞的保护作用，其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

关键词

脓毒症 / 肾损伤 / 利多卡因 / 炎症