miR-544靶向TGF-β抑制神经胶质母细胞瘤细胞迁移、侵袭及EMT

摘要

目的 探究miR-544在神经胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程中的作用及机制。方法 采用RT-qPCR检测miR-544及TGF-β在GBM组织和癌旁组织、GBM转移与非转移的病人血清中的表达。在GBM细胞系U251中转染MiR-544 mimics。采用Transwell、Western boltting检测细胞迁移及侵袭，EMT相关蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的变化。荧光素酶报告基因验证miR-544与TGF-β基因3’UTR区结合。结果 miR-544在GBM组织及转移组中表达显著降低；TGF-β显著升高(P<0.05)。荧光素酶报告证实miR-544靶向调节TGF-β3’-UTR区域。miR-544 mimics组及si-TGF-β组与NC组相比，细胞迁移与侵袭数目减少(P<0.05);E-cadherin蛋白表达增加，N-cadherin蛋白表达减少(P<0.05)。miR-544mimics+pcDNA-TGF-β组部分逆转了miR-544 mimics对细胞迁移与侵袭和EMT相关蛋白的表达的作用(P<0.05)。结论 miR-544靶向调控TGF-β是其参与EMT过程的作用机制之一。

关键词

miR-544 / EMT / TGF-β / 胶质母细胞瘤