咪达唑仑调节PERK/eIF2α/ATF4通路对OGD/R诱导的神经元损伤的影响

摘要

目的 探究咪达唑仑调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α激酶(eIF2α)/活化转录因子4(ATF4)通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元损伤的影响。方法 培养SH-SY5Y细胞，并分为对照组、OGD/R组、咪达唑仑组、咪达唑仑+OE组、咪达唑仑+OE-PERK组。CCK-8、LDH释放率以及TUNEL染色检测细胞增殖和凋亡；流式细胞术检测ROS水平和线粒体膜电位变化；试剂盒检测SOD、MDA和三磷酸腺苷(ATP)酶活性；透射电镜观察细胞线粒体超微结构。Western blot检测PERK/eIF2α/ATF4通路相关蛋白(p-PERK、p-eIF2α和ATF4)水平。结果 与对照组比较，OGD/R组细胞的OD450、SOD活性、线粒体膜电位、ATP含量显著降低(P<0.05);LDH释放率、TUNEL阳性细胞数量、ROS相对荧光强度、MDA表达及p-PERK、p-eIF2α和ATF4蛋白水平明显升高(P<0.05),线粒体肿胀，部分空泡化。与OGD/R组比较，咪达唑仑组可明显改善上述指标(P<0.05)。而与咪达唑仑+OE组比较，咪达唑仑+OE-PERK组可部分抵消咪达唑仑对上述指标的改善(P<0.05)。结论 咪达唑仑通过抑制PERK/eIF2α/ATF4通路缓解OGD/R诱导的神经元损伤。

关键词

咪达唑仑 / 蛋白激酶R样内质网激酶/真核翻译起始因子2α激酶/活化转录因子4 / 氧糖剥夺/复氧 / 神经元损伤 / 线粒体

基金资助

保定市科学技术局资助项目(2141ZF075)