miR-498通过调控抗氧化酶结构域蛋白1逆转喉癌顺铂耐药机制的研究

摘要

目的 探讨miR-498在逆转喉癌细胞顺铂耐药中的作用及其分子机制，明确miR-498是否通过靶向调控抗氧化酶结构域蛋白1（AAED1）影响喉癌顺铂耐药。方法 通过qRT-PCR检测miR-498在喉癌细胞中的表达水平；采用双荧光素酶报告实验验证miR-498与AAED1 3′UTR的结合关系；利用RIP实验确定二者在RISC复合体中的共结合；通过miR-498 mimic转染，检测AAED1的mRNA和蛋白表达变化；采用CCK-8实验评估细胞活力测定顺铂IC₅₀值分析化疗敏感性；Transwell实验检测细胞迁移能力；检测葡萄糖、ATP及乳酸含量以评估糖酵解水平。结果 miR-498在喉癌细胞中显著下调，其过表达可显著抑制细胞增殖和迁移并降低顺铂IC₅₀值，提示miR-498能增强喉癌细胞对顺铂的敏感性。双荧光素酶与RNA免疫共沉淀实验证实miR-498可直接结合AAED1 3′UTR并介导转录后抑制。miR-498 mimic转染后AAED1的mRNA和蛋白水平均显著下降。此外，miR-498过表达显著降低细胞葡萄糖消耗、ATP生成及乳酸产生，提示其抑制喉癌细胞糖酵解活性。结论 miR-498通过靶向抑制AAED1的表达，显著抑制喉癌细胞的增殖和迁移能力，削弱糖酵解代谢并增强顺铂敏感性。miR-498/AAED1调控轴在喉癌的化疗耐药形成中发挥重要作用，可能成为逆转顺铂耐药和改善喉癌预后的潜在分子靶点。

关键词

喉癌 / 顺铂耐药 / miR-498 / AAED1

基金资助

吉林省自然科学基金(学科布局项目)(20210101336JC)