单羧酸转运蛋白4调控口腔鳞状细胞癌肿瘤相关巨噬细胞极化的机制研究

摘要

目的 探讨靶向抑制单羧酸转运蛋白4(MCT4)对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化的影响及机制。方法 采用佛波醇-12-十四酸酯-13-乙酸酯(PMA)诱导人单核细胞白血病细胞(THP-1)为巨噬细胞后，以MCT4特异性抑制剂VB124或二甲基亚砜(DMSO)预处理，再与人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株CAL27进行Transwell共培养诱导TAMs。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测巨噬细胞和TAMs中MCT4的蛋白表达；流式细胞术、免疫荧光染色以及Western blot检测M1型标志物CD86和M2型标志物CD206的表达；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测M1相关细胞因子一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和趋化因子配体9(CXCL9)以及M2相关细胞因子白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)和精氨酸酶1(ARG1)的基因表达水平；Western blot检测核因子κB(NF-κB)通路关键分子p65的磷酸化水平及总蛋白表达。结果 Western blot检测显示，巨噬细胞和TAMs中均可检测到MCT4蛋白表达。与对照组比较，VB124处理后CD86表达显著降低(P<0.05),CD206表达显著升高(P<0.01)。RT-qPCR结果显示iNOS、TNF-α、CXCL9的基因表达水平均显著下调(P<0.01),而IL-10、TGF-β、ARG1的基因表达水平均显著上调(P<0.01)。与对照组比较，VB124处理后p65磷酸化水平显著升高(P<0.01),而p65总蛋白表达无明显变化。结论 抑制MCT4可促进TAMs向M2型极化，抑制M1型极化，其作用可能与NF-κB信号通路活性有关。

关键词

单羧酸转运蛋白4 / 口腔鳞状细胞癌 / 肿瘤相关巨噬细胞 / VB124 / 巨噬细胞极化