利多卡因对甲状腺癌细胞凋亡侵袭及PTEN/PI3K/AKT通路影响的研究

摘要

目的 探讨利多卡因（LID）对甲状腺癌（TC）细胞凋亡、侵袭及磷酸酯酶与张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路的影响。方法 将永生化人甲状腺乳头状癌细胞系（B-CPAP）随机分为Control组、L-LID组（0.1 mmol/L LID）、H-LID组（1 mmol/L LID）、VO组（35 nmol/L PTEN抑制剂VO-Ohpic trihydrate）、H-LID+VO组（1 mmol/L LID+35 nmol/L VO-Ohpic trihydrate）。CCK8和克隆形成检测各组细胞的增殖；划痕实验检测各组细胞的迁移；Transwell实验检测各组细胞的侵袭；流式细胞仪检测各组细胞的凋亡；Western blot检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PTEN、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT表达水平；RT-qPCR检测各组细胞中PTEN、PI3K、AKT mRNA表达水平；构建裸鼠移植瘤模型，测量肿瘤体积与瘤重，Western blot检测瘤组织PTEN、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平。结果 与Control组相比，L-LID组、H-LID组细胞的OD₄₅₀、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平及PI3K、AKT mRNA水平降低，而细胞凋亡率、Bax、PTEN mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）;与Control组相比，VO组细胞的OD₄₅₀、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平及PI3K、AKT mRNA水平升高，而细胞凋亡率、Bax蛋白、PTEN mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）;与H-LID组相比，H-LID+VO组细胞的OD₄₅₀、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平及PI3K、AKT mRNA水平升高，而细胞凋亡率、Bax蛋白、PTEN mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）;与VO组相比，H-LID+VO组细胞的OD₄₅₀、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平及PI3K、AKT mRNA水平降低，而细胞凋亡率、Bax蛋白、PTEN mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）。体内实验表明，L-LID组和H-LID组移植瘤体积、瘤重、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平较Control组降低，抑瘤率、PTEN水平升高（P<0.05）;VO组肿瘤体积、瘤重、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平较Control组升高，抑瘤率、PTEN水平降低（P<0.05）;与H-LID组相比，H-LID+VO组肿瘤体积、瘤重、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平升高，抑瘤率、PTEN水平下降（P<0.05）;与VO组相比，H-LID+VO组移植瘤体积、瘤重、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平降低，抑瘤率、PTEN水平升高（P<0.05）。结论 LID可显著抑制TC细胞恶性行为，可能与激活PTEN并抑制PI3K/AKT磷酸化有关。

关键词

利多卡因 / 甲状腺癌 / 磷酸酯酶与张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路 / 细胞凋亡 / 细胞侵袭