联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血液指标的影响

Effect of combined supplementation with sodium humate and acidifier on blood indicators of yellow-feathered broilers

摘要

为分析饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆生化指标、抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸的影响，本研究选取540只42日龄的黄羽肉鸡，按照体重随机分成3组，每组6个重复，每个重复30只。对照组饲喂无抗生素的基础饲粮，试验组分别饲喂联合添加0.5%和1%腐殖酸钠和酸化剂的试验饲粮。试验为期21 d，试验结束时，每个重复选2只鸡进行采血，测定血液生化指标、抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸的含量。结果表明：1）与对照组相比，0.5%组黄羽肉鸡的血浆中总蛋白（TP）和葡萄糖（GLU）的含量极显著提高（P＜0.01），谷丙转氨酶（ALT）活性和尿素（UREA）的含量则显著降低（P＜0.05）；1%组黄羽肉鸡血浆中总蛋白（TP）和葡萄糖（GLU）的含量极显著提高（P＜0.01）。与对照组和1%组相比，0.5%组肉鸡血浆中高密度脂蛋白（HDL）的含量极显著降低（P＜0.01）。2）与对照组相比，0.5%组肉鸡血浆的总抗氧化能力（T-AOC）显著提高（P＜0.05）。与对照组和1%组相比，0.5%组肉鸡血浆中丙二醛（MDA）的含量极显著降低（P＜0.01）。3）与对照组相比，0.5%组肉鸡血浆中白细胞介素-22（IL-22）和免疫球蛋白A（IgA）的含量显著提高（P＜0.05）；0.5%组和1%组肉鸡血浆中免疫球蛋白M（IgM）的含量极显著提高（P＜0.01）。4）与对照组相比，0.5%和1%组肉鸡血浆中赖氨酸（Lys）、缬氨酸（Val）、天冬氨酸（Asp）、丝氨酸（Ser）和必需氨基酸（EAA）的含量极显著提高（P＜0.01）。与1%组相比，对照组和0.5%组肉鸡血浆中组氨酸（His）的含量显著提高（P＜0.05）；此外，0.5%组肉鸡血浆中Lys、Asp、Ser和EAA的浓度极显著提高（P＜0.01）。与对照组和1%组相比，0.5%组肉鸡血浆中亮氨酸（Leu）、蛋氨酸（Met）、丙氨酸（Ala）和脯氨酸（Pro）含量显著提高（P＜0.05），异亮氨酸（Ile）、苏氨酸（Thr）、非必需氨基酸（NEAA）和总氨基酸（TAA）的含量极显著提高（P＜0.01）。综上，饲粮联合添加一定比例的腐殖酸钠和酸化剂可有效改善黄羽肉鸡机体内的代谢水平，提高血浆游离氨基酸水平，增强机体抗氧化能力和免疫功能，且添加0.5%的效果优于1%。

Abstract

In order to investigate the effects of dietary combined supplementation with sodium humate and acidifier on plasma biochemical indexes， antioxidant capacity， immune function and free amino acids of yellow-feathered broilers. In this study， a total of 540 yellow-feathered broilers aged 42 days were selected and randomly divided into three groups according to body weight with six replicates and 30 replicates each. The control group was fed the basal diet without antibiotics， and the test group was fed the test diets supplemented with 0.5% and 1% compound acidulants， respectively. The test was 21 d， and at the end of the test， two chickens per replicate were selected for blood collection and blood biochemical indices， antioxidant capacity， immune function and free amino acid content were determined. The results showed that： 1） Compared with the control group， the plasma levels of total protein （TP） and glucose （GLU） in yellow-feathered broilers in the 0.5% group were highly significantly increased （P＜0.01）， while the levels of alanine aminotransferase （ALT） activity and urea （UREA） were significantly decreased （P＜0.05）； in the 1% group the plasma levels of total protein （TP） and glucose （GLU） in yellow-feathered broilers were highly significantly increased （P＜0.01）. Compared with the control and 1% groups， the plasma content of high-density lipoprotein （HDL） in broilers in the 0.5% group was highly significantly decreased （P＜0.01）. 2） Compared with the control group， the total antioxidant capacity （T-AOC） of broiler plasma in the 0.5% group was significantly increased （P＜0.05）. Compared with the control and 1% groups， malondialdehyde （MDA） content of broiler plasma was highly significantly reduced in the 0.5% group （P＜0.01）. 3） Compared with the control group， the content of interleukin-22 （IL-22） and immunoglobulin A （IgA） in the plasma of broilers in the 0.5% group was significantly increased （P＜0.05）； the content of broiler plasma and immunoglobulin M （IgM） in the 0.5% and 1% groups were highly significantly increased （P＜0.01）. 4） Compared with the control group， the content of lysine （Lys）， valine （Val）， aspartic acid （Asp）， serine （Ser） and essential amino acids （EAA） in the plasma of broilers in the 0.5% and 1% groups was highly significantly increased （P＜0.01）. Compared with the 1% group， the content of histidine （His） in the plasma of broilers in the control and 0.5% groups was significantly increased （P＜0.05）； moreover， the concentrations of Lys， Asp， Ser and EAA in the plasma of broilers in the 0.5% group were highly significant （P＜0.01）. Compared with the control and 1% groups， the content of leucine （Leu）， methionine （Met）， alanine （Ala） and proline （Pro） in the plasma of broilers in the 0.5% group was significantly increased （P＜0.05）， and the content of isoleucine （Ile）， threonine （Thr）， non-essential amino acids （NEAA）， and total amino acids （TAA） were highly significantly increased （P＜0.01）. In summary， dietary supplementation with certain percentage of sodium humate and acidifier can effectively improve the yellow-feathered broiler's metabolic level in the organism， improve plasma free amino acid level， and enhance the organism's antioxidant ability and immune function， and the effect of adding 0.5% is better than 1%.

关键词

肉鸡 / 腐殖酸钠 / 酸化剂 / 抗氧化 / 免疫功能 / 氨基酸

Key words

broiler / sodium humate / acidifiers / antioxidant / immunity / amino acid

腐殖酸钠是一种有机弱酸盐，极易溶于水，是利用化学方法从褐煤、风化煤和泥炭中提取出来的一种有机弱酸盐^［1］。腐殖酸钠作为一种高分子化合物，具有较大的表面积，含有丰富的生物碱、维生素和生物活性物质，具有较强的络合力、离子交换作用、吸附作用和氧化还原能力等^［2-3］。此外，腐殖酸钠富含多种功能性基团（羟基、羧基、酚基和醌基等），具有抗菌、抗炎、抗氧化和免疫调节等功能^［4-6］。目前，在畜禽养殖业中，腐殖酸钠通常被用于治疗畜禽的消化不良、腹泻和急性中毒。酸化剂主要由酸和酸盐组成，可分为有机酸化剂、无机酸化剂和复合酸化剂。酸化剂在畜禽养殖业中已有几十年的历史，通常应用于畜禽饲料和饮水中^［7］。研究表明，酸化剂具有提高畜禽生长性能、维持肠道健康，促进营养物质消化吸收和增强机体抗氧化和免疫能力的功能^［8-10］。Akaichi等^［11-12］研究表明，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂可显著改善肉鸡的肉品质，并提高机体免疫功能。Aristimunha等^［13］研究表明，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂可有效改善肉鸡肠道结构，增强肠道屏障功能，提高机体免疫力。Edmonds等^［14］在肉鸡饲粮中添加腐殖酸钠和酸化剂，在热应激的环境中，可显著改善肉鸡的生长性能，并降低死亡率。

血液是宿主机体运输氧气、代谢物质和免疫因子等的重要载体，其中血液生化、抗氧化和免疫等指标反映了宿主机体代谢水平和健康状况，因此，血液指标对于评价宿主机体是否遭外界受感染和是否存在潜在疾病尤为重要^［15-16］。研究表明，饲粮补充适量的腐殖酸钠或有机酸可有效调节宿主机体的代谢功能，改善宿主的健康状况^［17-18］。目前，国内对于腐殖酸钠和酸化剂的研究均集中在单独使用，而对于联合使用腐殖酸钠和酸化剂的研究相对较少。前期研究发现，联合使用腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡的生长性能、器官指数、肌肉抗氧化能力和肉品质^［19］。但是否可以有效调节黄羽肉鸡的血液指标，改善肉鸡机体的健康水平尚未可知。因此，通过在饲粮中联合添加不同比例的腐殖酸钠和酸化剂，研究其对肉鸡血浆生化指标、抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸含量的影响，旨在为其在肉鸡生产中的应用提供科学依据。

1　材料与方法

1.1　试验材料

按照5∶4∶1的比例将腐殖酸钠、柠檬酸钙和乳酸钙混合均匀，形成腐殖酸钠和酸化剂的联合添加剂。其中，腐殖酸钠（河南某化工有限公司）中水溶性腐殖酸含量（干物质基础）≥70%；食品级柠檬酸钙（山东某食品科技有限公司）纯度≥98%；食品级乳酸钙（上海某生物科技有限公司）纯度≥99%。

选取540只42 日龄的快大型黄羽肉鸡（母鸡），平均体重（1 053.22±0.17） g，按照体重随机分为3组，每组6个重复，每个重复30只鸡，正试期3周。

1.2　试验设计

对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，试验组饲喂在基础饲粮中分别联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂（0.5%组）及1%的腐殖酸钠和酸化剂（1%组）的试验饲粮。基础饲粮参照NRC（2012）并结合中国农业行业标准《黄羽肉鸡仔鸡营养需要》（NY/T33-2004）进行配制。

1.3　试验饲粮

基础饲粮组成及营养水平见表1。

1.4　饲养管理和样品采集

动物试验在广东省农业科学院动物科学研究所试验场进行，采用地面平养模式进行饲养，试验期间肉鸡自由采食和饮水，并按照常规饲养程序和免疫程序进行饲养管理和免疫。

试验肉鸡饲养至63日龄时，空腹禁食12 h后，每个重复挑选2只，每组12只，共36只肉鸡进行采血试验。采用翅静脉采血的方式用EDTA-抗凝管进行采血，每只肉鸡采集10 mL，上下颠倒混匀后，离心（3 000 r/min）10 min，随后分离血浆并分装，置于-80 ℃冰箱保存，用于检测血液相关指标。

1.5　指标检测

1.5.1　血浆生化指标

按照试剂盒说明书（中生北控生物科技股份有限公司），使用全自动生化分析仪（SELECTRA Pro XL型，威图，荷兰）检测肉鸡血浆中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、尿酸（UA）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）的含量以及谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的活性。

1.5.2　抗氧化指标

按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）说明书检测肉鸡血浆中过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）的活性以及丙二醛（MDA）的含量。

1.5.3　免疫指标

按照ELISA试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）说明书检测肉鸡血浆中白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-22（IL22）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量。

1.5.4　游离氨基酸谱

取300 μL血浆样品，加入900 μL 10%的磺基水杨酸钠（V/V），混合均匀，4 ℃，12 000 r/min离心10 min，吸取上清用0.22 μm水相滤膜过滤至样品瓶中，使用全自动氨基酸分析仪（L8900，日立，日本）进行分析，并计算必需氨基酸，非必需氨基酸和总氨基酸含量。

1.6　数据处理

血生化指标、抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸的数据均以重复组为统计单位。采用SPSS 20.0进行单因子方差分析（One-way ANOVA， LSD），并以Duncan氏法进行多重比较检验。所有数据均表示为平均值±标准误，P＜0.05表示差异显著，P＜0.01表示差异极显著，P＞0.05表示差异不显著。

2　结果与分析

2.1　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

由表2可知，与对照组相比，饲粮添加0.5%和1%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高黄羽肉鸡血浆中TP和GLU的含量（P＜0.01）。与对照组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著降低肉鸡血浆中ALT的活性以及UREA的含量（P＜0.05）。与对照组和1%组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高肉鸡血浆中HDL的含量（P＜0.01）。不同饲粮处理对黄羽肉鸡血浆中ALB、UA、TG、CHO和LDL的含量以及AST的活性无显著性影响（P＞0.05）。

2.2　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆抗氧化能力的影响

由表3可知，与对照组和1%组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著降低黄羽肉鸡血浆中MDA的含量（P＜0.01）。与对照组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中T-AOC的活性（P＜0.05）。不同饲粮处理对黄羽肉鸡血浆中CAT、GSH-Px和T-SOD的活性无显著性影响（P＞0.05）。

2.3　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆免疫功能的影响

由表4可知，与对照组和1%组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高黄羽肉鸡血浆中IL-22的含量（P＜0.05）。与对照组相比，饲粮添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中IgA的含量（P＜0.05）。与对照组相比，饲粮添加0.5%和1%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高黄羽肉鸡血浆中IgM的含量（P＜0.01）。不同饲粮处理对黄羽肉鸡血浆中IL-8、IL-10、IFN-γ、TNF-α和IgG的含量（P＞0.05）。

2.4　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆游离氨基酸含量的影响

由表5可知，与对照组和1%组相比，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高肉鸡血浆中TAA的浓度（P＜0.01）。在EAA中，与1%组相比，对照组和0.5%组肉鸡血浆中His的浓度显著提高（P＜0.05）。与对照组和1%组相比，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中Leu和Met的浓度（P＜0.05），极显著提高Ile、Lys、Thr和EAA的浓度（P＜0.01）。与对照组相比，饲粮联合添加1%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高肉鸡血浆中Lys的浓度（P＜0.01）；0.5%和1%组肉鸡血浆中Val和EAA的浓度极显著提高（P＜0.01）。在NEAA中，与对照组和1%组相比，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中Ala和Pro的浓度（P＜0.05），极显著提高Asp、Ser和NEAA的浓度（P＜0.01）。与对照组相比，饲粮联合添加1%的腐殖酸钠和酸化剂可极显著提高肉鸡血浆中Asp和Ser的浓度（P＜0.01）。不同饲粮处理对黄羽肉鸡血浆中Arg、Phe、Trp、Asn、Cys、Glu、Gln、Gly和Tyr的浓度均无显著影响（P＞0.05）。

3　讨　论

3.1　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

血浆生化指标是反映畜禽机体内物质代谢水平的重要指标。TP、ALB和UREA是反映畜禽机体蛋白质代谢的主要指标，其中TP含量升高表示蛋白质的合成代谢旺盛，有助于提高畜禽的生产性能；UREA是蛋白质分解的产物之一，其含量的降低，有助于蛋白质的沉积^［20-21］。Akaichi等^［12］的研究结果表明，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂对肉鸡的血液生化指标无显著影响，这与本研究结果不一致，这可能与添加的配比、构成成分、添加剂量、饲养动物、饲养环境和样本数量等有关。在本研究中，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂显著提高了黄羽肉鸡血浆中TP的含量，并降低了UERA的含量。王凯英等^［21］研究表明，血液中TP含量与饲粮蛋白水平和表观消化率有关以及健康状况（机体大量失水等）有关；还发现，适量酸化剂有助于蛋白质合成。在本研究中，饲粮的营养水平和肉鸡机体的健康状况均属于正常水平，因此，肉鸡血浆中TP含量升高与营养物质表观消化率提高有关；而UREA含量降低可能是酸化剂促进机体蛋白质的合成，降低了UREA的浓度。

ALT和AST是氨基酸代谢过程中的重要酶，且在肝脏中有较高的活性，当肝脏细胞受损或通透性增加时，ALT和AST会随细胞流入血液，致使血液中ALT和AST活性增加，因此，血浆中ALT和AST活性是反映畜禽机体肝功能状态的一个重要指标^［22-23］。王铭洋等^［23］研究发现，酸化剂可以显著降低蛋鸡血液中ALT和AST的活性，有效缓解蛋鸡的肝脏损伤。在本研究中，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著降低肉鸡血浆中ALT的活性，且对AST无显著影响，表明饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂不会损伤肝细胞，给肉鸡机体带来不良影响。

血浆中TG、CHO、HDL和LDL浓度是评价畜禽机体脂代谢的主要指标，其中HDL可促进周围组织中CHO的释放，并将其转运至肝脏中进行分解，当HDL的含量降低时，将影响肝脏的脂代谢功能^［24］。研究表明，有机酸化剂可通过提高肝脏中脂肪酶的活性来改善肉鸡的脂代谢功能^［25］。本研究结果显示，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中HDL的含量，表明饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂有助于改善肉鸡肝脏的脂代谢功能。这可能是有机酸化剂提高了肝脏中脂肪酶活性，加快了高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）在肝脏中的分解，进而提高了血液HDL的浓度，改善机体肝脏脂代谢功能。

血浆中GLU的含量反映了畜禽肠道吸收GLU进入血液的水平，这与畜禽肠道对饲粮中碳水化合物的消化吸收有关^［26］。柠檬酸钙和乳酸钙属有机酸盐，在宿主胃环境中，柠檬酸钙和乳酸钙被分解为柠檬酸和乳酸，降低宿主胃肠道环境中的pH，提高胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等活性，提高宿主对营养物质的吸收^［27］。也有研究表明，腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡对饲粮中营养物质的表观消化率^{［2， 28］}。本研究结果显示，饲粮联合添加0.5%和1%的腐殖酸钠和酸化剂均显著提高肉鸡血浆中GLU的含量，这可能是因为饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂降低了肉鸡肠道中的pH，提高了胃肠道环境中消化酶的活性，进而促进了肉鸡肠道对饲粮中营养物质的消化与吸收，提高了血浆中GLU的浓度。

3.2　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆抗氧化能力的影响

抗氧化能力是反映畜禽机体健康水平的重要指标之一，畜禽机体的抗氧化能力与氧化自由基的清除率有关，一般情况下，畜禽机体内氧化自由基的产生和清除处于平衡状态。腐殖酸钠具有多种功能性基团，具有较强的氧化还原能力，可通过提高抗氧化酶活性和清除氧化自由基来提高动物机体的抗氧化能力^［29-31］。柠檬酸参与畜禽机体的三羧酸循环，产生ATP，为机体提供能量，从而提高氧化自由基的清除率，增强抗氧化能力，而乳酸钙可抑制脂质过氧化过程，提高抗氧化能力^［32-33］。在本研究中，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡机体的T-AOC，并降低MDA的含量，这也与试验前期的研究结果（联合添加腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡胸肌的抗氧化能力）一致^［19］。腐殖酸钠和酸化剂之所以提高肉鸡机体的抗氧化能力：一是因为腐殖酸钠含有酚羟基和醌基等功能团，醌基在电子传递过程中其重要作用，可有效清除体内氧化自由基，是腐殖酸钠起抗氧化作用的重要功能团；二是因为柠檬酸和乳酸分别参加机体内的三羧酸循环和糖酵解途径，为机体提供大量ATP，增强机体的清除氧化自由基的功能，提高抗氧化能力^［19］。因此，联合使用腐殖酸钠和酸化剂可以提高肉鸡机体的抗氧化能力。

3.3　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆免疫功能的影响

一般情况下，畜禽机体内的免疫系统处于平衡状态，当免疫系统失衡时，炎症反应爆发，炎症因子产生紊乱，严重影响畜禽机体的健康水平^［32］。IL-22是由激活的T细胞产生的细胞因子，其介导的信号通路可增强周围组织细胞的免疫反应，进而提高畜禽机体免疫力^［34］。免疫球蛋白是一类参与畜禽机体内体液免疫的球蛋白，目前肉鸡机体内的球蛋白主要有IgA、IgG和IgM^［35］。在本研究中，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中IL-22、IgA和IgM的含量，表明联合添加腐殖酸钠和酸化剂在一定程度上可以增强黄羽肉鸡的免疫功能。试验前期研究结果发现，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂可提高肉鸡的免疫器官指数，增强肉鸡机体的免疫功能，这与本研究结果相呼应^［16］。也与Akaichi等^［12］的研究结果相似。Yu等^［36］研究表明，肠道菌群与宿主免疫系统之间存在共生关系。Xu等^［37］研究发现，小鼠肠道乳酸菌丰度的增加与大鼠血清中的IgA和IgG含量呈正相关。目前，已有研究表明，腐殖酸钠和酸化剂之间具有协同作用；饲粮添加腐殖酸钠或酸化剂可降低肠道环境的pH值，促进有益菌的生长与繁殖，抑制致病菌的生长，改善肠道菌群结构^{［2，38-40］}。因此，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂增强肉鸡机体的免疫功能，可能与其改善肉鸡肠道的菌群结构有关。

3.4　联合添加腐殖酸钠和酸化剂对黄羽肉鸡血浆游离氨基酸含量的影响

血浆中游离氨基酸含量受环境、营养和疾病等多种因素影响，可直接参与畜禽机体内氨基酸代谢和蛋白质沉积，反映畜禽机体的营养状况^［41］。在本研究中，饲粮联合添加腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡血浆中EAA、NEAA和TAA的含量。研究表明，血浆游离氨基酸的含量受饲粮蛋白水平和氨基酸平衡状况的影响；而腐殖酸钠和酸化剂可显著提高肉鸡对饲粮中营养物质的表观消化率^{［2，27，42］}。因此，肉鸡血浆中EAA、NEAA和TAA的含量，可能与腐殖酸钠和酸化剂提高肉鸡对饲粮养分表观消化率有关。

游离氨基酸除了参与蛋白质和多肽的构成，还具有调节和维持动物生长、繁殖、免疫和抗氧化等关键代谢途径的作用^［43］。其中，His常以肌肽的形式发挥抗炎、抗氧化和维持机体pH稳定等作用^［44-45］。Leu、Ile和Val被称为支链氨基酸（Branched chain amino acid，BCAA），可通过mTOR信号通路促进蛋白质合成，并抑制蛋白质降解；通过调控活性氧（Reactive oxygen species，ROS）系统，降低ROS的产生，提高抗氧化能力；还可作为信号因子调控糖代谢，维持机体能量平衡^［46-48］。Lys、Met和Thr是肉鸡饲粮中的三大限制性氨基酸，在蛋白质合成和免疫应答方面发挥重要作用^［49-51］。Ala和Asp参与畜禽机体内的三羧酸循环和尿素循环，为畜禽机体供能。Pro可清除畜禽机体内的ROS，诱导氧化自由基凋亡，特别是超氧阴离子自由基（O^2-），还可作为信号因子调控畜禽机体的免疫系统^{［43，52］}。Ser可为畜禽机体内的氧化还原平衡和还原生物合成提供吡啶核苷酸^［53］。在本研究中，饲粮联合添加0.5%的腐殖酸钠和酸化剂提高了肉鸡血浆中His、Leu、Ile、Val、Lys、Met、Thr、Ala、Asp、Pro和Ser的含量，这表明联合使用腐殖酸钠和酸化剂可通过调控游离氨基酸的含量来改善肉鸡机体对氨基酸的利用率，促进蛋白质沉积，增强抗氧化能力和免疫功能。这与0.5%组血浆中TP和GLU含量显著升高，UREA含量显著降低，抗氧化能力显著提高和免疫功能显著增强的结果相呼应。

4　结　论

综上，饲粮联合添加一定比例的腐殖酸钠和酸化剂可有效改善黄羽肉鸡机体内的代谢水平，增强机体抗氧化能力和免疫功能，提高血浆游离氨基酸水平，且添加0.5%的效果优于1%。

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基金资助

广东省科技计划项目(2023B0202010020)

猪禽种业全国重点实验室项目(2023QZ-NK09)

广东省清远市清城区现代农业产业园项目

岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心自主科研项目(DT20220022)

清远市科技计划项目(2021DZX018)

江门市科技计划项目(2021660200370006997)