CircANKEF1通过调控miR-183/EGR1、miR-127/MAPK4和miR-129/CDK6轴影响牛前脂肪细胞增殖分化

白雪; 汪书哲; 杨梦丽; 冀国尚; 刘源; 楚洪恩; 李芬; 蔡蓓; 马云

中国农业大学学报 ›› 2026, Vol. 31 ›› Issue (5) : 154 -165.

白雪, 汪书哲, 杨梦丽, 冀国尚, 刘源, 楚洪恩, 李芬, 蔡蓓, 马云

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摘要

为探讨circANKEF1作为分子海绵靶向miRNA和mRNA调控牛前脂肪细胞增殖分化具体作用机制，本研究通过过表达circANKEF1后的前脂肪细胞进行RNA-seq，筛选circANKEF1的潜在靶miRNA，利用双荧光素酶确定靶miRNA与circANKEF1与靶mRNA的靶向关系。qRT-PCR与WB检测脂肪标志基因PPARγ、C/EBPα、增殖标志基因PCNA、CDK2的mRNA与蛋白水平的相对表达变化，油红O染色反映脂滴累积情况。CCK-8与EdU检测增殖变化。结果表明，1）过表达circANKEF1后，共鉴定出53种差异表达的miRNA(31种上调，22种下调)；2）通过靶调控分析，发现circANKEF1可以与miR-183、miR-127和miR-129相互作用；3)miR-183、miR-127和miR-129分别通过其靶基因EGR1、MAPK4和CDK6来影响前脂肪细胞的增殖分化。综上，circANKEF1可通过miR-183/EGR1、miR-127/MAPK4和miR-129/CDK6轴调控牛前脂肪细胞的增殖分化。本研究为深入理解肉牛肌内脂肪发育的分子调控机制提供理论依据。