基于gB蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立

摘要

为建立一种针对牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotrachetitis virus,IBRV）的早期快速检测方法，并能判定免疫后是否再次发生感染，本研究利用原核表达IBRV gB蛋白，并通过SDS-PAGE和Western blot检测gB蛋白的表达，并初步建立基于gB蛋白检测IBRV的间接ELISA方法。结果表明：1）对IBRV标准阳性血清，本试验方法的最低检测限度为1∶4 096，说明建立的gB-ELISA检测方法具有较高的敏感性。2）该方法对其他4种常见的牛疫病阳性血清检测均为阴性，不存在交叉反应，表明该方法具有良好的特异性。3）在对200头牛的临床样品的检测中，该方法与IDEXX(IBRV gB X3)抗体检测试剂盒符合率高达97.5%。综上，本研究建立的gB-ELISA检测方法敏感性高，特异性好，该方法为开发一种在感染早期快速对疾病进行诊断，并可以判定疫苗免疫后是否再次发生IBRV感染的试剂盒奠定基础。

关键词

牛传染性鼻气管炎病毒 / gB蛋白 / ELISA

基金资助

国家自然科学基金项目（32260893）; 内蒙古自治区自然科学基金项目（2022MS03019）; 内蒙古自治区“高等学校青年科技人才发展项目”（NJYT23094）; 内蒙古农业大学兽医学院教学改革项目（SYJG202305）