艾美耳球虫转基因操作研究30年：进展、挑战与未来方向

摘要

由艾美耳属球虫感染引起的球虫病是全球畜禽业最常见、最重要的寄生虫病之一。过去30年，随着分子生物学与基因工程技术的协同发展，艾美耳球虫转基因操作技术实现了从基础载体构建到高效基因编辑系统的革命性突破，这一技术演进不仅深化了科研工作者对球虫基础生物学的认知，更为开发新一代基因工程活疫苗提供了关键技术支撑。本文综述了近30年来球虫转基因操作技术的重要突破与挑战，包括：1）从瞬时转染到稳定转染系统的技术演进，包括启动子筛选、报告基因优化等表达调控体系的建立。2)CRISPR/Cas9等新型基因编辑工具的引入与应用。3）重点探讨了球虫转基因操作技术在多价疫苗开发、多病原广谱保护性疫苗设计以及耐药基因筛选与作用机制解析等领域的创新应用。4）尽管球虫作为疫苗活载体具有宿主特异性强、高质量免疫应答等独特优势，但在体外连续培养体系、外源基因表达水平精准调控、免疫保护效力存在显著个体差异等诸多挑战。未来，随着球虫功能基因组学和转录组学的深入研究，通过结合CRISPR/Cas9基因编辑系统与条件诱导表达技术，有望实现目的基因的特异性精准调控，突破转基因球虫规模化制备的技术瓶颈，进而推动其在多病原广谱新型黏膜疫苗开发中的实际应用。

关键词

艾美耳球虫 / 转基因技术 / 重组疫苗 / 功能基因组学